新規ACE2ホモローグcollectrinの腎発生・進行性腎障害への関与

新型 ACE2 同源物集合蛋白参与肾脏发育和进行性肾衰竭

• 批准号: 04F04241
• 负责人: 槇野 博史
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04241/
• 关键词: collectrin; ACE2; HNF-1β; 腎発生; 糸球体硬化

我々は、進行性腎障害に共通の分子メカニズムを明らかにするために、5/6腎臓摘出ICRマウスの腎肥大期において発現の上昇する遺伝子のスクリーニングを行ってきた(Zhang H et al.Kidney Int 56(2),549-558,1999)。すなわち糸球体硬化や、腎間質の線維化を来たす前段階の遺伝子変化がその後の腎硬化の成立に重要であると考えたからである。よってこれらの遺伝子群の同定は進行性腎障害の新しい分子メカニズムが明らかになるばかりではなく、新しい治療ターゲットの同定につながると考えられる。そういった遺伝子群のなかの一つであるNX-17は様々な臓器のノーザン解析から、腎臓特異的に発現することが明らかとなった。さらにこの遺伝子の全長のcoding sequenceをマウス、ヒト、ラットにおいてクローニングしたところ、まったく新規の遺伝子であることが判明した。その遺伝子産物は222アミノ酸残基からなり、N末端にシグナルペプチドをと膜ドメインを有するため膜蛋白であると考えられた。In situ hybridizationやポリクローナル抗体による免疫染色の結果、腎皮質部及び髄質部の集合管特異的に発現することが判明した。そのホモロジーサーチより最近その存在が明らかとなったangiotensin converting enzyme 2 (ACE2)と47.8%の相同性があることも判明した。そこで我々はこの新規膜蛋白をcollectrinと命名し報告するに至っている(Zhang H et al.J Biol Chem 276(20),17132-17139,2001)。Collecrinの構造はまったく新規であるため、その機能の推測は困難であった。しかしヒトcollectrin遺伝子の転写領域を検討した結果Hepatocyte nuclear factor-1α (HNF-1α)の結合配列があることが明らかとなった。腎臓においてはHNF-1βが強く発現しているが、ヒトのHNF-1βの遺伝子異常は糖尿病を来たすことが知られており、MODY5 (maturity onset diabetes of the young)と呼ばれている。HNF-1βは主に腎臓に発現しており、そのほか肝臓、膵臓、腸管にもわずかに存在する。Collectrinの発現調節特にHNF-1βとの関連を検討するために、M-1、mIMCD-3細胞のほか複数の集合管細胞細胞株を入手し、CollectrinとHNF-1βの発現を検討した。またCollectrinとの相互作用をもつ蛋白群の同定のために、Yeast two hybrid systemを開始し、5/6腎摘マウス腎臓からmRNAを抽出し、ライブラリーを作製し、スクリーニングを終了した。さらにその蛋白相互作用を免疫沈降などの方法で確認した。

A common molecular marker for progressive renal impairment is the development of a 56-cell cycle of ICR and renal hypertrophy (Zhang H et al. Kidney Int 56(2), 549 - 558, 1999). It is important to investigate the development of glomerular sclerosis and renal interstitial fibrosis in the early stages of renal fibrosis. The new molecular structure of progressive renal impairment is the same as that of the new treatment group. The NX-17 is a special device for detecting and detecting the virus. The length of the coding sequence of the code is determined by the number of words in the code. The gene product is 222 amino acid residues, N-terminal amino acid residues and membrane protein residues. In situ hybridization, immunostaining results for multiple antibodies, detection of collecting tubule specific in renal cortex and cytoplasm were identified. The identity of angiotensin converting enzyme 2 (ACE2) is 47.8%. The new membrane protein collectrin was named by Zhang H et al. J Biol Chem 276(20), 17132 - 17139, 2001. Collecrin's structure is difficult to predict. The results show that the binding of Hepatocyte nuclear factor-1α (HNF-1α) is very important. HNF-1β is strongly expressed in the kidney, and HNF-1β is strongly expressed in the kidney. MODY5 (maturity onset diabetes of the young) is called MODY. HNF-1β is found in the kidneys, liver, kidneys, and intestines. To investigate the relationship between HNF-1β and the expression of Collectrin in multiple collecting tube cell lines including M-1, mIMCD-3 cells. Collectrin interaction with protein group identity, Yeast two hybrid system to start, 5/6 kidney extract, kidney mRNA to control, kidney to stop The protein interaction between the two proteins was confirmed by immunoprecipitation method.

项目成果

糖尿病性腎症 糖尿病合併症の診かた・考え方

糖尿病肾病 如何诊断和思考糖尿病并发症

• 发表时间: 2004
• 作者: 岡田達夫;和田淳;槇野博史
• 通讯作者: 槇野博史

Changes in serum leptin concentrations in overweight Japanese men after exercise.

超重日本男性运动后血清瘦素浓度的变化。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Diabetes Obes Metab 6(5)
• 作者: Miyatake N;Takahashi K et al.
• 通讯作者: Takahashi K et al.

Identification of adipocyte adhesion molecule (ACAM), a novel CTX gene family, implicated in adipocyte maturation and development of obesity

• DOI: 10.1042/bj20041709
• 发表时间: 2005-04-15
• 期刊: BIOCHEMICAL JOURNAL
• 影响因子: 4.1
• 作者: Eguchi, J;Wada, J;Makino, H
• 通讯作者: Makino, H

Galectin-9 inhibits glomerular hypertrophy in db/db diabetic mice via cell-cycle-dependent mechanisms

• DOI: 10.1681/asn.2004110915
• 发表时间: 2005-11-01
• 期刊: JOURNAL OF THE AMERICAN SOCIETY OF NEPHROLOGY
• 影响因子: 13.6
• 作者: Baba, M;Wada, J;Makino, H
• 通讯作者: Makino, H

The role of adrenomedullin and receptors in glomerular hypertension in streptozotocin-induced diabetic rats.

肾上腺髓质素和受体在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾小球高血压中的作用。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Kidney Int 65
• 作者: Hiragushi K;Wada J et al.
• 通讯作者: Wada J et al.