染色体構造のナノスケール解析
染色体结构的纳米级分析
基本信息
- 批准号:04F04653
- 负责人:
- 金额:$ 0.77万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2004
- 资助国家:日本
- 起止时间:2004 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究では、溶液中におけるセミインタクトな試料のイメージング・分子認識・力学的計測・ハンドリングを行う技術の開発を試みた。具体的な実験成果は以下のとおりである。(1)化学・生体分子修飾プローブの作製方法の確立原子間力顕微鏡(AFM)による分子認識・力学的計測・ハンドリングを行う上で必要不可欠である、汎用性のあるAFMプローブの化学・生体分子修飾方法の確立を行った。・シリコン製AFMプローブに対し、3-aminopropyltriethoxysilane (APTES)により表面をアミノ化修飾したプローブと、さらにNHS-NHS linker (Disuccinimidyl suberateあるいはEthylene glycol bis (succinimidyl succinate))で化学修飾したプローブの二種類を作製した。・APTESによるアミノ化に関しては、気相法(化学蒸着法(Chemical Vapor Deposition))と液相法の異なる修飾法での修飾を試み、その修飾面の物性評価を行った。その結果、気相法を用いた場合の方が修飾反応を制御しやすく、再現性良くかつ均一な表面修飾を行うことが出来ることが明らかとなった。・NHS-NHS linkerを介することで、任意のタンパク質をプローブ表面に結合させることが可能となった。(2)生体分子修飾プローブを用いた力測定実験上述の方法により作製したNHS化・アミノ化プローブに対し、生体分子の一例として牛血清アルブミン(BSA)を反応させ、生体分子修飾プローブを作製した。これらBSA修飾プローブ、アミノ化プローブ、未修飾プローブを用い、マイカ基板に対する力学的相互作用の液中測定を行い、製作したプローブの評価を行った。・アミノ化プローブ、未修飾プローブの場合ではプローブと基板との間に強い吸着が見られたが、一方で、BSA修飾プローブに関しては吸着が全く認められなかった。このことは、プローブ・基板間の吸着をBSA分子が阻害していることを示しており、このことから実際にプローブ先端にBSA分子が結合していることが確認された。
This study で は, solution に お け る セ ミ イ ン タ ク ト な sample の イ メ ー ジ ン グ, molecular understanding, mechanical measuring · ハ ン ド リ ン グ を line う technology の open 発 を try み た. The specific experimental results of な are as follows とお とお である である. (1), chemical modification of living body, プ ロ ー ブ の の cropping method establish the interatomic force 顕 micro mirror (AFM) に よ る molecular understanding, mechanical measuring · ハ ン ド リ ン グ を line う で necessary not owe で あ る, universal の あ る AFM プ ロ ー ブ の method, chemical modification of living body, の line established を っ た. AFM, シ リ コ ン system プ ロ ー ブ に し seaborne, 3 - aminopropyltriethoxysilane (APTES) に よ り surface を ア ミ ノ chemical modification し た プ ロ ー ブ と, さ ら に NHS - the NHS would (Disuccinimidyl The suberateある (succinimidyl succinate) is で chemically modified by <s:1> たプロ ブ ブ で and produced by two types を. , APTES に よ る ア ミ ノ change に masato し て は, 気 phase method (Chemical steamed method (Chemical Vapor Deposition)) と liquid phase method is の different な る oxymoron で の modified を み, そ の modified surface の property evaluation 価 を line っ た. そ の results, 気 phase method を い た occasions の party が modify the 応 を suppression し や す く, good reproducibility く か つ な uniform surface modification を line う こ と が out る こ と が Ming ら か と な っ た. , the NHS - the NHS would を interface す る こ と で, arbitrary の タ ン パ ク qualitative を プ ロ ー ブ surface に combining さ せ る こ と が may と な っ た. (2) modification of living body プ ロ ー ブ を with い た measurement be 験 の way above に よ り cropping し た the NHS, ア ミ ノ change プ ロ ー ブ に し seaborne, living body molecular の case と し て bovine serum ア ル ブ ミ ン (BSA) を anti 応 さ せ, modification of the raw body プ ロ ー ブ を cropping し た. こ れ ら BSA modified プ ロ ー ブ, ア ミ ノ change プ ロ ー ブ, undecorated プ ロ ー ブ を い, マ イ カ substrate に す seaborne る mechanical interaction の liquid line in the determination of を い, making し た プ ロ ー ブ の review 価 を line っ た. · ア ミ ノ change プ ロ ー ブ, undecorated プ ロ ー ブ の occasions で は プ ロ ー ブ と substrate と の に between strong い sorption が see ら れ た が, one party で, BSA modified プ ロ ー ブ に masato し て は sorption が く all recognize め ら れ な か っ た. こ の こ と は, プ ロ ー ブ, between substrate の sorption を BSA molecules が resistance against し て い る こ と を shown し て お り, こ の こ と か ら be interstate に プ ロ ー ブ apex に が combined with BSA molecules し て い る こ と が confirm さ れ た.
项目成果
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