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色覚進化解明の試み:視細胞可視化ゼブラフィッシュによる視物質遺伝子発現制御の解析

尝试阐明色觉进化：感光细胞可视化斑马鱼视觉物质基因表达调控分析

基本信息

批准号：
04J11736
负责人：
武智正樹
金额：
$ 1.79万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

ゼブラフィッシュ青タイプ視物質遺伝子(SWS2)が網膜Long Single Cone(LSC)に特異的に発現する為のゲノム上における発現制御領域を探索した。様々な長さのゲノム上流領域を蛍光タンパク質であるgreen fluorescent protein(GFP)レポーターにつないで受精卵に導入し、正負の制御領域を検討した。まず当該遺伝子がLSC特異的に発現するための制御領域が近傍の上流領域約300bp内に存在することを示唆する結果を得た。この領域を他のゼブラフィッシュ視物質遺伝子の上流に組み込んだヘテロコンストラクトを作製して同様にレポーターアッセイを行ったこところLSCに発現を誘導することができた。以上のことから、この約300bp内にLSC特異的に発現するための制御領域が存在していることを明らかにした。また、さらにこの過程で当該遺伝子を発現するLSCをGFPにより可視化したトランスジェニックブラフィッシュ(TransGenic ZebraFish:TGZF)を複数樹立した。このTGZFは網膜あるいは視細胞の発生研究に非常に有用であるため、既に国内外の研究者に提供し、共同研究を開始している。次に、当該遺伝子が網膜視細胞以外の組織において発現が抑制されるための制御領域を探索した。この結果、網膜short single coneで発現が抑制されるために必要な上流領域89bpを同定した。さらに網膜の双極細胞の抑制に関わるOTX結合配列、および脳の松果体光受容細胞での発現を抑制するための9bpから成る新規シスエレメントをそれぞれ同定した。

The discovery of a special retinal Single Cone(LSC) called SWS2 is an exploration of the control field of retinal development. A green fluorescent protein(GFP) is a protein that can be used to control the development of a fertilized egg. When this gene is detected in the LSC specific domain, the control domain is located within about 300bp of the upstream domain. This domain contains all kinds of visual material. It contains all kinds of visual material. It contains all kinds of visual material. The LSC specific discovery domain exists within about 300bp of the above. During this process, LSC GFP is visualized as a vector (TransGenic ZebraFish:TGZF). This TGZF is very useful for the development of visual cells, both for domestic and foreign researchers, and for joint research. In addition, when the gene develops in tissues other than retinal visual cells, it is explored in the control field. As a result, the short single cone of the retina was found to be inhibited. The upstream domain was 89bp. The inhibition of OTX binding in bipolar cells of the retina and the inhibition of the production of photoreceptors in pineal gland are also determined.