低分子プローブを用いたアブシジン酸生合成・代謝機構の解明

使用小分子探针阐明脱落酸生物合成和代谢机制

基本信息

  • 批准号:
    15710158
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.43万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2003
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2003 至 2004
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.5'α,8'-シクロ-ABAのin vitro代謝検討本研究中に,シロイヌナズナCYP707AがABA8'-水酸化酵素遺伝子として同定された。そこで,この遺伝子を昆虫細胞で発現させて得たABA8'-水酸化酵素活性ミクロソーム画分を使って,5'α,8'-シクロ-ABAの水酸化反応を調べた。その結果,前年度に報告したin vivo実験と同様に5'α,8'-シクロ-ABAは全く水酸化を受けないことがわかった。また,5'α,8'-シクロ-ABAはABAの弱い拮抗阻害剤になっていることも明らかになった。2.ABA8'-水酸化酵素の基質特異性これまでに合成した45種類のABAアナログを用いて,ABA代謝不活化の鍵酵素であるABA8'-水酸化酵素の基質特性を精査した。まず,シロイヌナズナCYP707A3ミクロソームを用いて,すべてのアナログの水酸化実験を行い,水酸化のための構造要求性を調べた。次に,ABAとABAアナログを同時に供与して水酸化実験を行い,ABAアナログのABA水酸化阻害活性を測定した。その結果,(1)水酸化される部位(C-8')とその近傍(C-9')を修飾すると,水酸化を受けない,(2)側鎖のカルボキシル基を還元したり空間配置を変化させると水酸化を受けない,(3)側鎖6位のメチル基と環1'の水酸基を除去しても水酸化を受ける,ということが判明した。また,水酸化を受けないアナログの多くがABA水酸化阻害活性(拮抗阻害)を示した。この結果は,ABA8'-水酸化酵素の水酸化反応に対する基質構造要求性は比較的厳しく,基質結合部位への結合に関する構造要求性は水酸化反応の場合ほど厳しくないことを示唆している。以上の情報は,ABA8'-水酸化酵素に特異的な阻害剤を創製するのに極めて有用である。
1. The in vitro metabolism of 1.5'α,8'-シクロ-ABA was studied in this study, and the enzyme residue of シロイヌナズナCYP707A and ABA8'-water acidification enzyme was determined in this study. The activity of ABA8'-water acidifying enzyme has been obtained from insect cells. The クロソームdraws the points to make the って, 5'α,8'-シクロ-ABAのwater acidification reaction を adjusts the べた.そのRESULTS, previous year's にreportしたin vivo実験と同様に5'α,8'-シクロ-ABAは全く水 acidificationけないことがわかった.また,5'α,8'-シクロ-ABAはABAの weak antagonism blocks 剤になっていることも明らかになった. 2. The substrate specificity of ABA8'-water acidifying enzyme has been synthesized and used in 45 kinds of ABA, and the key enzyme that does not activate ABA metabolism has been carefully investigated.まず,シロイヌナズナCYP707A3ミクロソームを用いて,すべてのアナログのwater acidification実験を行い, water acidificationのためのstructural requirementsを Adjustmentべた. At the same time, ABA and ABA are used to measure the inhibitory activity of ABA and water acidification.その results, (1) water acidification of the される part (C-8') and とその near (C-9') を modification すると, water acidification of the けない, (2) side locking のカルボキシルbase を元したりSpace configuration を変化させるとWater acidification をReceived けない, (3) Side lock 6-position のメチルThe base と ring 1'のwater acid group を removes し て も water acidification を accepts け る, と い う こ と が clarifies し た.また, water acidification is affected by けないアナログの多くがABA water acidification inhibiting activity (antagonistic inhibition) をshows した.このRESULTS は, ABA8'-water acidifying enzyme のwater acidification reaction に対する matrix structure requirements は 厳 し く, base The binding site of the substance is the structural requirement of the acidification reaction of the water and the acidification of the water. According to the above information, ABA8'-water acidifying enzyme is a very effective inhibitor of specific inhibitors.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Yasushi Todoroki: "Metabolism of 5'α8'-cycloabscisic acid, a highly potent and long-lasting abscisic acid analogue, in radish seedlings"Bioorganic & Medicinal Chemistry. 12(2). 363-370 (2004)
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  • 影响因子:
    0
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  • DOI:
  • 发表时间:
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