生物活性糖鎖迅速合成プロセスの開発

生物活性糖链快速合成工艺的开发

• 批准号: 16390011
• 负责人: 伊藤 幸成
• 金额: $ 4.35万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16390011/
• 关键词: 糖鎖; 迅速合成法; チオグリコシド; グリコシルフルオリド; グリコシル化反応; ハイスループット最適化法

糖鎖は著しい構造多様性を持っており、その機能の解明において合成化学的な切り口が推進力として機能するためには合成手法の迅速化が重要である。糖鎖の合成は多段階にならざるを得ないが、その殆どのステップにおいてクロマトグラフィーによる分離精製操作が必要になりこれが合成の迅速化を妨げている。これを踏まえて、本研究はより実践的な糖鎖迅速合成法の確立に向け、1)精製操作を必要としない糖鎖液相合成、2)糖鎖伸長反応(グリコシル化)のハイスループット最適化法、の2点について検討を行なう予定で開始した。1)については以下の成果を得た。無精製合成プロセスを実現するために、i)ろ過、分液操作等の後処理で副生物を除去できるチオグリコシドまたはグリコシルフルオリド活性化系を用いる、ii)一時的保護基として選択的な脱保護が可能揮発性の副生物を与えるものを用いる、iii)最終段階で、本研究室で開発したCapture-release法による糖鎖の釣り上げを行う、iv)あらかじめ還元末端に導入した置換基の疎水性を利用して選別を行う、という4つの方策を組み合わせることを検討した。その結果、揮発性保護基としてはペンタフルオロプロピオニル基、t-ブチルジメチルシリル基が有効であることを見いだし、最終段階でのCapture-release法による糖鎖の釣り上げができることも確認した。2)に関しては、重水素ラベルした保護基を導入した糖ブロックを合成し、これらを用いたグリコシル化反応の結果(収率、選択性)をMALDI-TOF-MSとNMRにより評価できることを見いだした。

聚糖具有显着的结构多样性，为了使合成化学方法充当阐明其功能的驱动力，加快合成方法很重要。尽管糖链的合成被迫处于多个阶段，但其中大多数需要色谱分离和纯化程序，从而防止快速合成。考虑到这一点，这项研究的启动是为了建立一种更实用的快速方法来合成聚糖，目的是检查两个点：1）不需要纯化的液相液相合成，并且2）2）高通量优化方法用于聚糖扩展反应（Glycosylation）。关于1），获得了以下结果：为了实现未纯化的合成过程，我们考虑结合四个策略：i）使用硫糖苷或糖基氟化物激活系统，该系统可以通过过滤，分离，ii）使用临时保护的方法来选择副产品的临时方法，从而消除副产品的副产品，该方法可以选择为diptive the Offerative the deptive the ii deptive the II依次依次，以ii依次逐步进行依次，以ii依次进行依次，以供副产品逐步逐步逐步依次，从而可以选择性地逐步依赖依次的依据。最后阶段的实验室，以及iv）使用在还原端引入的取代基的疏水性，以执行选择。结果，发现五氟丙基丙酰基基和T丁二甲基甲二基甲硅烷基团作为挥发性保护组有效，并且可以证实糖链可以在最后阶段被捕获释放方法捕获。关于2），我们发现合成了具有氘标记的保护组的糖块，并且可以通过MALDI-TOF-MS和NMR评估使用这些糖基化反应的结果（产率，选择性）。

项目成果

Synthesis of glycoprotein molecular probes for the analyses of protein quality control system

用于蛋白质质量控​​制系统分析的糖蛋白分子探针的合成

• 发表时间: 2004
• 期刊: Glycoconjugate Journal 21
• 作者: K.Totani;I;Matsuo;M.Takatani;M.M.Arai;S.Hagihara;Y.Ito
• 通讯作者: Y.Ito

Synthesis of a bisubstrate-type inhibitor of N-acetylglucosaminyltransferases

N-乙酰氨基葡萄糖转移酶双底物型抑制剂的合成

• 发表时间: 2004
• 期刊: Angew.Chem.Int.Ed. 43
• 作者: S.Hanashima;S.Manabe;K.Inamori;N.Taniguchi;Y.Ito
• 通讯作者: Y.Ito

Synthesis of fluorine substituted oligosaccharide analogues of monoglucosylated glycan chain, a proposed ligand of lectin-chaperone calreticulin and calnexin

• DOI: 10.1023/b:glyc.0000045109.60425.2e
• 发表时间: 2004-01-01
• 期刊: GLYCOCONJUGATE JOURNAL
• 影响因子: 3
• 作者: Ito, Y;Hagihara, S;Takatani, M
• 通讯作者: Takatani, M

Accelerated glycosylation under frozen conditions

• DOI: 10.1016/j.tetlet.2004.03.100
• 发表时间: 2004-05
• 期刊: Tetrahedron Letters
• 影响因子: 1.8
• 作者: M. Takatani;J. Nakano;M. Arai;A. Ishiwata;H. Ohta;Yukishige Ito

Tight binding ligand approach to oligosaccharide-grafted protein

寡糖接枝蛋白的紧密结合配体方法

• 发表时间: 2004
• 期刊: Bioorg.Med.Chem.Lett. 14
• 作者: K.Totani;I.Matsuo;Y.Ito
• 通讯作者: Y.Ito