植物3量体Gタンパク質βγサブユニットの機能解析

植物三聚体G蛋白βγ亚基的功能分析

• 批准号: 16770037
• 负责人: 藤澤 由紀子
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Fukui Prefectural University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16770037/
• 关键词: イネ; 3量体Gタンパク質; 形質転換体; RNAi; シグナル伝達; 形質転換植物

・イネ3量体Gタンパク質βサブユニットの発現抑制個体の解析平成17年度にRNAi法を用いたRGB1の発現抑制個体を作出した。形質転換には、野生型イネ(日本晴)と、αサブユニット変異体d1(DK22(日本晴バックグラウンドのd1))を宿主として用いた。RGB1-N末端RNAi導入個体は、日本晴、DK22両バックグラウンドともに矮性、致死、小粒、分けつ減少などの表現型を示した。また、すでに媛性を示しているDK22は、RGB1-N末端RNAi導入によりさらに矮化した。また、βサブユニットの発現抑制個体に特異的にラミナジョイント部位の枯死がみられた。さらに、βサブユニットの発現抑制個体では、成熟した花粉がほとんど出来ていなかった。また、成熟種子の縦方向の長さが日本晴、あるいはDK22よりも短くなる表現型を示した。DK22をバックグラウンドに持つβサブユニットの発現抑制個体の種子では、DK22の種子よりもさらに縦方向が短くなった。βサブユニット遺伝子のプロモーターにGUS遺伝子を連結し、イネに導入した。得られた形質転換体を用いて、βサブユニットの発現抑制個体で異常な表現型が見られた組織についてGUS染色を行った。その結果、ラミナジョイント部位、および葉鞘、葉身でGUSの発現が確認できた。・イネ3量体Gタンパク質βγサブユニットの過剰発現個体の作出RGB1およびRGG1をユビキチンプロモーターで過剰発現させたイネを作出した。得られた形質転換体は、それぞれの発現抑制個体と同じ表現型を示した。

・Analysis of the RNAi method of 2017 using the RNAi method of 2017 to analyze the current inhibitory individuals of the 3-dimensional Gタンパクβサブユニットの発 was created using the RGB1 current inhibitory individuals. Morphological change, wild-type イネ(Nipponbare)と, αサブユニット変 variant d1 (DK22(Nihonbare バックグラウンドのd1)) and host として use いた. RGB1-N-terminal RNAi was introduced into individual は, Nipponbare, and DK22バックグラウンドともにdwarf, lethal, small particles, and reduced などのphenotypes.また, すでに媛性を肖しているDK22は, RGB1-N-terminal RNAi introduction によりさらに dwarfing した.また, βサブユニットの発 appears to suppress the individual's specific にラミナジョイント parts of the のがみられた.さらに、βサブユニットの発appears to suppress individual では, mature したpollen がほとんど出ていなかった.また, mature seeds の縦 direction のlong さがNipponbare, あるいはDK22 よりもshort くなるphenotype をshow した. DK22をバックグラウンドにholdつβサブユニットの発appears to suppress individual The body's seeds are short and the DK22's seeds are short. βサブユニット伝子のプロモーターにGUS 伝子をconnectionし、イネに Importした. In order to obtain the morphological changes of the body, we used いて, β サブユニットの発 to suppress the abnormal phenotype of the individual, and the られた tissue was stained with GUS.そのRESULTS, ラミナジョイント parts, およびleaf sheaths, leaf body でGUSの発 appear がconfirmation できた.・イネ3-dimensional Gタンパク性βγサブユニットの国产発appeared individual creation RGB1およびRGG1をユビキチンプロモーターで过剰発现させたイネを出した. Obtained られたmorphological change body は, それぞれの発appears to suppress the individual and has the same phenotype をshow した.