植物3量体Gタンパク質βγサブユニットの機能解析

植物三聚体G蛋白βγ亚基的功能分析

• 批准号: 16770037
• 负责人: 藤澤 由紀子
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Fukui Prefectural University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16770037/
• 关键词: イネ; 3量体Gタンパク質; 形質転換体; RNAi; シグナル伝達; 形質転換植物

・イネ3量体Gタンパク質βサブユニットの発現抑制個体の解析平成17年度にRNAi法を用いたRGB1の発現抑制個体を作出した。形質転換には、野生型イネ(日本晴)と、αサブユニット変異体d1(DK22(日本晴バックグラウンドのd1))を宿主として用いた。RGB1-N末端RNAi導入個体は、日本晴、DK22両バックグラウンドともに矮性、致死、小粒、分けつ減少などの表現型を示した。また、すでに媛性を示しているDK22は、RGB1-N末端RNAi導入によりさらに矮化した。また、βサブユニットの発現抑制個体に特異的にラミナジョイント部位の枯死がみられた。さらに、βサブユニットの発現抑制個体では、成熟した花粉がほとんど出来ていなかった。また、成熟種子の縦方向の長さが日本晴、あるいはDK22よりも短くなる表現型を示した。DK22をバックグラウンドに持つβサブユニットの発現抑制個体の種子では、DK22の種子よりもさらに縦方向が短くなった。βサブユニット遺伝子のプロモーターにGUS遺伝子を連結し、イネに導入した。得られた形質転換体を用いて、βサブユニットの発現抑制個体で異常な表現型が見られた組織についてGUS染色を行った。その結果、ラミナジョイント部位、および葉鞘、葉身でGUSの発現が確認できた。・イネ3量体Gタンパク質βγサブユニットの過剰発現個体の作出RGB1およびRGG1をユビキチンプロモーターで過剰発現させたイネを作出した。得られた形質転換体は、それぞれの発現抑制個体と同じ表現型を示した。

·Analysis of RGB1 gene expression inhibition individuals using RNAi method in 17 years The host has the following characteristics: mutant, wild-type (Japanese clear), alpha (Japanese clear), mutant d1(DK22(Japanese clear)). RGB1-N-terminal RNAi introduced individuals showed short, lethal, small, and reduced phenotypes. DK22 is the first to introduce RNAi into the RGB1-N terminal. The occurrence of β-ray and β-ray is inhibited by the death of the individual.さらに、βサブユニットの発现抑制个体では、成熟した花粉がほとんど出来ていなかった。The phenotype of mature seeds is shown in the direction of Japanese sunny and DK22. The seed of DK22 is selected from the seed of DK22, and the seed of DK22 is selected from the seed of DK22.βIn addition, the expression of GUS was inhibited in individuals with abnormal phenotypes. The results of the test, the position of the plant, the sheath and the body of the plant were confirmed. 3. The quality of the product is βγ. The product is produced by RGB1 and RG1. The product is produced by β γ. The expression of the same phenotype was inhibited by the change of phenotype.