高等植物3量体Gタンパク質の機能解析

高等植物三聚体G蛋白的功能分析

• 批准号: 12037216
• 负责人: 岩崎 行玄
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Fukui Prefectural University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12037216/
• 关键词: Gibberellin; G protein; Plant hormone; Rice

(1)イネ3量体Gタンパク質の発現場所の解析イネ3量体Gタンパク質αサブユニット遺伝子(RGA1)遺伝子のプロモーター領域(上流900bp)から第3エキソンまでを含む断片に、GUS遺伝子を連結させた形質転換イネを作出した。成熟したイネの茎頂、受粉後3日目の球状胚、受粉後1週間目(第1葉分化期)の茎頂、第1葉原基、幼根原基には、GUS活性は検出されなかった。発現が確認された組織は、胚盤上皮細胞、アリューロン層、伸長節間、節、発達初期の外穎と内穎、および成熟した花粉である。これらの結果より、植物型Gタンパク質は細胞伸長や分泌等の輸送に関与し、細胞分裂には関与しないと推定した。(2)3量体Gタンパク質が関与するシグナルの同定植物3量体Gタンパク質が関与する植物ホルモンとして、ジベレリンに着目し、ジベレリン添加後のαアミラーゼの誘導機構を解析した。イネアリューロン層において、ジベレリン添加後、GAMybとαアミラーゼの転写産物は、野生型に比べ、大黒d1では抑制されていた。このことは、イネアリューロン層では、3量体Gタンパク質は、ジベレリン情報伝達に関与し、転写因子であるGAMybの発現を制御していると考えられた。(3)活性型αサブユニットの作出とその機能解析In vitro mutagenesis法を用いて、αサブユニットに、恒常的に活性型を示すと予想される改変遺伝子を作出した。R191C、Q223L、A356Sの変異体は、GTP結合能を有し、かつ、GTPase活性は、消失していた。このことは、恒常的に活性型の変異体が作出で来たことを示した。(5)遺伝学的手法による大黒d1と類似の表原型を示す変異体の変異遺伝子の単離イネ矮性変異体d11の変異遺伝子の単離を、マップベースクローニング法を用いて行っている。染色体4番の長椀に位置するd11座は、RFLPマーカーL353より0.12cM(7個体)、C559より0.15cM(9個体)に位置することを明らかにした。

(1) measure the body

项目成果

Tanaka-Ueguch,M. et al: "Rice dwarf mutant, d1, which is defective in the αsubunit of the heterotrimeric G protein, affects gibberellin signal transduction"Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 97. 11638-11643 (2000)

Tanaka-Ueguch, M. 等人：“水稻矮化突变体 d1，其异源三聚体 G 蛋白的 α 亚基有缺陷，影响赤霉素信号转导”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 97. 11638-11643 (2000) ）

Kato,T. et al: "Molecular cloning and Characterization of a cDNA for a rice Sec31P homolog"Biosci.Biotechnol.Biochem. 64. 2490-2492 (2000)

加藤，T.

Tanabe S.B. et al: "High resolution map of rice dwarf mutant gene, dwarf 11."Rice Genetics Newsletter. (in press).

田边 S.B.