抑制制御分子発現制御システムによる新規マスト細胞活性化シグナル伝達分子の探索

使用抑制性控制分子表达控制系统寻找新型肥大细胞激活信号转导分子

• 批准号: 16790074
• 负责人: 中村 亮介
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: National Institute of Health Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790074/
• 关键词: マスト細胞; シグナル伝達; 抑制制御分子; SLAP; CISH; デキサメタゾン

本研究は、シグナル伝達の抑制制御分子の発現制御システムを用い、アレルギー反応において重要な役割を果たしているマスト細胞のIgE受容体を介するシグナル伝達を詳細に解析しようというものであった。申請者は、特に抑制制御分子SLAP (Src-like adaptor protein)およびCISH (cytokine-inducible SH2 containing protein)に着目し、RNA干渉法を用いてこれらの分子の発現制御システムを構築し、マスト細胞の活性化を解析しようと試みた。まず、申請者はRT-PCR、5'/3'-RACE法によりラットSLAPの完全長cDNAを単離することに成功した。その結果、ラットSLAP cDNAは846塩基から成り、ヒトおよびマウスのオルソログとアミノ酸配列にしてそれぞれ86%および94%の相同性があることが分かった。これを基にラットSLAPのC末端側の14残基のペプチド(RKSSLFSAPQYFED)に対するウサギ抗血清を作製し、RNA干渉法によるSLAPタンパク質の発現解析を行なったところ、本実験系に用いたラット培養マスト細胞株RBL-2H3細胞は、siRNA (short interference RNA)の導入効率が悪く、当初想定していたほどのタンパク質レベルの発現ノックダウン効果が得られないことがわかった。そこで、発現解析に関してはmRNAの網羅的発現解析を行なうことにした。その結果、SLAPはマスト細胞の抗原による高親和性IgE受容体の架橋シグナルによりその発現が誘導され、刺激から3時間後に発現のピークを迎えることが分かった。一方、サイトカインシグナルの抑制制御分子であるCISHの発現は12時間後にピークを迎え、両抑制制御分子は、マスト細胞活性化の異なるステージにおいてアレルギー反応の抑制に関与する可能性が示唆された。

In this study, the prevention and control molecules are used to prevent and control the production of IgE capacitors. In this study, the system is used to control the use of the system. The applicant and the special control molecule SLAP (Src-like adaptor protein) and CISH (cytokine-inducible SH2 containing protein) are focused on the target, and the RNA method is used to determine the activation of the molecule and the cell. Both the applicant and the applicant RT-PCR, the 5'/3'-RACE method proves that the SLAP is fully grown and the cDNA has been successfully registered. The results show that the results show that the SLAP cDNA data is not valid, and that the data are different from each other. The results show that the data are similar to each other in the same way. The antiserum was used as antiserum. The antiserum was used as antiserum. The antiserum was used as antisera. The antiserum was detected by RNA dry method. The results showed that the antiserum was isolated from the C-terminal of SLAP. The results showed that the antisera were isolated from the cell line RBL-2H3 cell line, siRNA (short interference RNA) cell line, siRNA (short interference RNA) cell line. At the beginning, I wanted to tell you that I didn't know what was going on in the first place. The current resolution line of the mRNA network will not be available. The results showed that the cellular antigen level of SLAP was high and that of sexual IgE receptor was high. After 3 minutes of stimulation, the positive response was detected after stimulation. On the one hand, you need to know that the control molecules are responsible for the inhibition of CISH. After 12 hours, the inhibition of the control molecules, the activation of the cells, the activation of the cells, the inhibition of the cells, the inhibition of the cells, and the possibility of inhibition.

项目成果

Development of Allergen Database for Food Safety (ADFS) : an integrated database to search allergens and predict allergenicity.

食品安全过敏原数据库（ADFS）的开发：一个用于搜索过敏原和预测过敏性的综合数据库。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Bulletin of National Institute of Health Sciences 123
• 作者: Ryosuke Nakamura;Reiko Teshima;Kayoko Takagi;Jun-ichi Sawada
• 通讯作者: Jun-ichi Sawada

The hyperresponsiveness of W/W(v) mice to oral sensitization is associated with a decrease in TCRγδ-T cells.

W/W(v) 小鼠对口服致敏的高反应性与 TCRγδ-T 细胞的减少有关。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biological & Pharmaceutical Bulletin 28
• 作者: Haruyo Okunuki;Reiko Teshima;Yuji Sato;Ryosuke Nakamura;Hiroshi Akiyama;Tamio Maitani;Jun-ichi Sawada
• 通讯作者: Jun-ichi Sawada

Gene expression profiling of dexamethasone-treated RBL-2H3 cells : induction of anti一inflammatory molecules.

地塞米松处理的 RBL-2H3 细胞的基因表达谱：抗炎分子的诱导。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Immunology Letters 98
• 作者: Ryosuke Nakamura;Haruyo Okunuki;Seiichi Ishida;Shogo Ozawa;Yoshiro Saito;Reiko Teshima;Jun-ichi Sawada
• 通讯作者: Jun-ichi Sawada

Gene expression profiling of dexamethasone-treated RBL-2H3 cells: induction of anti-inflammatory molecules

• DOI: 10.1016/j.imlet.2004.12.009
• 发表时间: 2005-05-15
• 期刊: IMMUNOLOGY LETTERS
• 影响因子: 4.4
• 作者: Nakamura, R;Okunuki, H;Sawada, J
• 通讯作者: Sawada, J