死因に関連する骨折の受傷後経過時間推定:免疫組織学的、分子生物学的手法による解析

与死亡原因相关的骨折受伤后经过的时间估计：使用免疫组织学和分子生物学方法进行分析

• 批准号: 16790366
• 负责人: 高宮 正隆
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790366/
• 关键词: 骨折; サイトカイン; 増殖因子; 線溶系; 遺伝子発現; 定量的PCR法; in situ hybridization法; 免疫組織化学

[目的]骨折の受傷後経過時間は法医学的に重要な情報の一つである。我々はこれまで皮膚を中心とした検討を行ってきたが、mRNAは蛋白に先んじて変動しており、外部環境への曝露度が低いほどマーカーの死後保存性は高いことを示唆するデータを得ている。よって骨折試料に分子生物学的手法を導入することにより、骨折後急性期から有用で死後変化に耐えうる診断法の確立が可能であると考えられる。本年度はIL 10、tissue type plasminogen activator(tPA)、urokinase type plasminogen activator(uPA)について検討した。[方法]マウスを用い、Bonnarensらの大腿骨骨折モデルにより骨折を作成した。すなわちハロセンで吸入麻酔後、右大腿骨にL字鋼をあて固定した。さらにこのL字鋼に200gの分銅を高さ20cmのところから衝突させ骨折を作成した。骨折作成後、240時間まで経時的に骨試料を採取し、quantitative PCRを用いて定量的に、またin situ hybridization法を用いて発現部位の経時的変化を検討した。[結果および考察]骨折部位を肉眼的に観察すると骨折作成後144時間後には骨折断端に化骨が形成され、240時間後には骨折断端の肥厚を認めたが、それ以前の期間には変化を認めなかった。IL 10 mRNA発現量は骨折後24時間にピークとなり、組織学的には骨細胞、骨芽細胞、macrophageに発現が認められた。またtPA mRNA発現量は骨折後1時間から24時間後にかけて軽度の上昇があり、72時間後にピークとなり、144から240時間後までの発現量は健常組織と同等であった。一方uPA mRNAには骨折治癒過程における発現量の変動を認めなかった。本検討の結果からIL 10 mRNA、tPA mRNAは骨折後急性期のエイジングに応用可能な因子と考えられた。

[Objective] Important に な information on the elapsed time after a fracture or injury in <s:1> forensic medicine に - である. I 々 は こ れ ま で skin を center と し た 検 line for を っ て き た が, mRNA は protein に ん first じ て - move し て お り, external environment へ の exposure degree low が い ほ ど マ ー カ ー の died to save sex は high い こ と を in stopping す る デ ー タ を must て い る. よ っ て fracture sample に molecular biology technique を import す る こ と に よ り, fracture after acute か ら useful で - after the death of the に え resistant う る diagnostics の may establish が で あ る と exam え ら れ る. This year, <s:1> IL 10, tissue type plasminogen activator(tPA), urokinase type plasminogen activator(uPA)に に に て検 て検 て検 て検 discuss た. [Method] ウスを is made into a た た using ウスを, Bonnarensら <s:1> thigh bone fracture モデ モデ によ <s:1> <s:1> を fracture を. Youdaoplaceholder0 すなわちハロセ で で after inhaling hemp 酔, the right thigh bone に L-shaped steel をあて is fixed to <s:1> た. さ ら に こ の L word steel に 200 g の points high copper を さ 20 cm の と こ ろ か ら conflict さ せ fracture を made し た. Fractures, 240 time after made ま で 経 に bone when sample を take し, policy PCR を い て quantitative に, ま た the in situ hybridization method を with い て 発 now parts の 経 when variations of を beg し 検 た. [results お よ び investigation] fracture を eye に 観 examine す る と fracture made after 144 time に は に turn bone fracture end が form さ れ, after 240 time に は の hypertrophy of fracture end を recognize め た が, そ れ の before during に は variations change を recognize め な か っ た. The occurrence of IL-10 mRNA at にピ 24 time after fracture にピ にピ とな とな とな とな in histology, に bone cells, bone bud cells and macrophages に occurrence が recognition められた. ま た tPA mRNA 発 now quantity は fracture after 1 time か ら after 24 time に か け て 軽 degrees の rise が あ り, after 72 time に ピ ー ク と な り, 144 か ら after 240 time ま で の 発 now quantity は health organizations often と equal で あ っ た. The healing process of one party 's uPA mRNAに fracture における occurrence quantity <s:1> variation を confirmation めな った った. Beg の results this 検 か ら IL 10 mRNA, tPA mRNA は fracture after acute の エ イ ジ ン グ に 応 with possible な factor と え ら れ た.

项目成果

Studies on mRNA expression of tissue-type plasminogen activator in bruises for wound age estimation

• DOI: 10.1007/s00414-004-0453-4
• 发表时间: 2004
• 期刊: International Journal of Legal Medicine
• 影响因子: 2.1
• 作者: M. Takamiya;K. Saigusa;R. Kumagai;N. Nakayashiki;Y. Aoki