実験的自己免疫性筋炎におけるICOSの病態関与とICOS阻害治療

ICOS在实验性自身免疫性肌炎中的病理学参与和ICOS抑制治疗

基本信息

批准号：
16790561
负责人：
勝又康弘
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790561/
关键词：
多発性筋炎 ICOS

项目摘要

これまで我々は、Lewisラットへのヒト組換えC蛋白フラグメントの免疫で、多発性筋炎の実験モデル動物である実験的自己免疫性筋炎(experimental autoimmune myositis,EAM)を安定して誘導できることを確認し、報告した。今回我々は、6週齢の雌Lewisラットにヒト組換えC蛋白フラグメントを週1回、計3回免疫すると共に、抗ICOS抗体またはコントロール抗体を初回免疫の1週間後から週2回投与した。最終免疫の2週間後にラット後肢筋組織を採取し、HE染色を行い、炎症スコアを測定した。各種1次抗体を用いて免疫染色を行った。リンパ節と脾臓からリンパ球を分離し、C蛋白に対する反応性を検討した。屠殺時に採血を行い,抗C蛋白抗体の血清中濃度をELISA法で測定した。コントロール抗体を投与したC蛋白免疫ラット筋組織では無治療ラットEAMでの検討と同様な激しい筋炎所見を認め、筋炎組織へのCD8陽性T細胞とCD11b/c陽性マクロファージの浸潤と、CD8陽性T細胞におけるICOSの発現を認めた。一方、抗ICOS抗体投与群ではコントロール抗体投与群に比べて組織学的炎症スコアの有意な改善を認めた。また、筋組織においてICOSの発現は認めなかった。しかし、C蛋白で刺激したリンパ節細胞や脾細胞の^3H-thymidineの取り込みとIFN-γ産生は、両群で用量依存性に増加し、抗ICOS抗体投与によっては低下しなかった。ラット血清中の組換えC蛋白フラグメントに対する抗体価も,両群とも無処置ラット群に比べて上昇しており,2群間で有意な差は認めなかった。上記の結果は本EAMの病態形成におけるICOS-ICOSリガンドの相互作用の重要性を示すと考えられた。抗ICOS抗体による病態改善の機序として抗原刺激によるT細胞増殖の抑制や自己抗体産生の抑制を想定したが,今回の研究では確認できなかった。

到目前为止，我们已经证实并报告说，刘易斯大鼠中人类重组C蛋白片段的免疫可稳定诱导实验性自身免疫性肌炎（EAM），这是一种实验性的多聚肌炎动物。在本文中，我们每周三次用人重组C蛋白片段对6周龄的雌性刘易斯大鼠进行免疫，并从初次免疫后的一周开始两次抗ICOS或对照抗体。最终免疫后两周，收集大鼠后肢肌肉组织，染色并测量炎症评分。使用各种主要抗体进行免疫染色。从淋巴结和脾脏中分离出淋巴细胞，并检查了对C蛋白的反应性。在屠宰时收集血液，并通过ELISA测量抗C蛋白抗体的血清浓度。 c蛋白免疫大鼠的肌肉组织施用对照抗体显示严重的肌炎，与未经处理的大鼠大鼠EAM研究的肌炎相似，CD8阳性T细胞和CD11b/C阳性巨噬细胞的侵袭是在CD8阳性T细胞中的ICOS中的CD11b/C阳性巨噬细胞的表达。另一方面，与对照抗体辅助组相比，抗ICOS抗体抗体施用组的组织学炎症评分有显着改善。此外，在肌肉组织中未观察到ICOS的表达。然而，在两组中，用C蛋白刺激的淋巴结细胞和脾细胞的IFN-γ产生的摄取量依赖性地增加，而不是通过抗ICOS抗体的给药而降低。与两组未经处理的大鼠组相比，大鼠血清中重组C蛋白片段的抗体滴度也增加了，并且两组之间未观察到显着差异。上述结果被认为证明了ICOS-ICOS配体在该EAM发病机理中相互作用的重要性。我们假设抗原刺激抑制了T细胞增殖和自身抗体的产生，作为通过抗ICOS抗体改善病理的机制，但这项研究尚未确认。