好中球と細胞外マトリックスとの相互作用による角膜実質細胞の活性化の検討

检查由于中性粒细胞和细胞外基质之间的相互作用引起的角膜细胞的活化

• 批准号: 16791050
• 负责人: 福田 憲
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16791050/
• 关键词: 好中球; コラーゲン; 角膜実質細胞; サイトカイン; MMP; 3次元ゲル内培養; 角膜潰瘍

本年度は,昨年度の研究結果を基に,I型コラーゲンゲルとの相互作用により好中球より放出され,角膜実質細胞を活性化させる因子の検索を行った。1)好中球の培養上清に,副腎皮質ステロイドおよび漢方薬の抽出物であるトリプトライドを添加して培養し,角膜実質細胞のコラーゲン分解活性を測定した。またRNAを抽出し,real-time PCR法を用いてMMP mRNAの発現を検討した。ステロイド剤およびトリプトライドはいずれも濃度依存的に,好中球培養上清によって促進された角膜実質細胞によるコラーゲンゲル分解を抑制した。またこれらの薬剤は角膜実質細胞のMMP mRNAの発現を抑制した。2)好中球の培養上清にIL-1 receptor antagonistを添加して角膜実質細胞のコラーゲン分解活性を測定した。その結果,IL-1 receptor antagonistの濃度依存的にコラーゲン分解が抑制された。3)好中球を健常人の末梢血より分離し,単層培養あるいはコラーゲンゲル内において一定時間培養し,培養上清を回収し,Multi-Plexサスペンションアレイシステムで17種類のサイトカイン濃度を測定した。I型コラーゲンゲル内で培養した好中球では単層培養した好中球に比し,TNF-αやIL-1βなどの炎症性サイトカインの産生の促進が認められた。またIL-8などの種々のケモカインの産生促進も認められた。好中球によるIL-8の産生はゲル内のコラーゲンの濃度依存的に促進された。これらの結果より,好中球はコラーゲンゲルで培養すると活性化され,種々のサイトカインやケモカインを放出し,これらの因子が角膜実質細胞に作用してコラーゲンゲル分解を促進することが明らかとなった。またこれらの相互作用によるコラーゲンゲル分解は,ステロイド剤やトリプトライドなどの薬剤によって制御可能であることが明らかとなった。

This year, based on the results of the previous year's study, the interaction between type I cells and the release of factors in the activation of corneal cells was investigated. 1)The culture supernatant of the cornea and the extract of the pararenal cortex were added to the culture medium, and the degradation activity of the corneal stromal cells was determined. RNA extraction and real-time PCR were used to detect MMP mRNA expression. In addition, the concentration dependent culture supernatant of the cornea can promote the degradation of corneal cells. The expression of MMP mRNA in corneal stromal cells was inhibited by anti-inflammatory agents. 2)IL-1 receptor antagonist was added to the culture supernatant of corneal stromal cells to determine their catalytic activity. As a result, the concentration-dependent decomposition of IL-1 receptor antagonist was inhibited. 3)In addition, the concentration of 17 kinds of proteins in the culture supernatant was determined after a certain period of culture. The promotion of TNF-α and IL-1β production in inflammatory cells is recognized in the culture of type I cells. The production of IL-8 was promoted. The production of IL-8 in the medium is promoted by concentration dependence. As a result, the cells in the cornea are activated, and the cells in the cornea are released. These factors act on the cells in the cornea and promote their decomposition. The interaction between the two groups may be resolved, and the two groups may be controlled.

项目成果

Inhibitory effect of triptolide on chemokine expression induced by proinflammatory cytokines in human corneal fibroblasts

• DOI: 10.1167/iovs.05-0010
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: INVESTIGATIVE OPHTHALMOLOGY & VISUAL SCIENCE
• 影响因子: 4.4
• 作者: Lu, Y;Fukuda, K;Nishida, T
• 通讯作者: Nishida, T

アレルギー性結膜疾患における角膜線維芽細胞の役割

角膜成纤维细胞在过敏性结膜疾病中的作用

• 发表时间: 2005
• 期刊: 日本眼科学会雑誌 109・11
• 作者: T.Deguchi;Arinami T. et al.;福田憲
• 通讯作者: 福田憲

Inhibition of gap junction-mediated intercellular communication by TNF-α in cultured human corneal fibroblasts

• DOI: 10.1167/iovs.04-0840
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: INVESTIGATIVE OPHTHALMOLOGY & VISUAL SCIENCE
• 影响因子: 4.4
• 作者: Hao, JL;Suzuki, K;Nishida, T
• 通讯作者: Nishida, T

Lipopolysaccharide-induced expression of intercellular adhesion molecule-1 and chemokines in cultured human corneal fibroblasts

• DOI: 10.1167/iovs.04-0922
• 发表时间: 2005-01-01
• 期刊: INVESTIGATIVE OPHTHALMOLOGY & VISUAL SCIENCE
• 影响因子: 4.4
• 作者: Kumagai, N;Fukuda, K;Nishida, T
• 通讯作者: Nishida, T

Dexamethasone inhibition of IL-1-induced collagen degradation by corneal fibroblasts in three-dimensional culture.

• DOI: 10.1167/iovs.04-0051
• 发表时间: 2004-09
• 期刊: Investigative ophthalmology & visual science
• 影响因子: 4.4
• 作者: Ying Lu;K. Fukuda;Yang Liu;N. Kumagai;T. Nishida