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分裂酵母における前胞子膜形成の分子メカニズムの解明

阐明裂殖酵母前孢子膜形成的分子机制

基本信息

批准号：
05J03452
负责人：
中村道子
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Osaka City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J03452/
关键词：
分裂酵母胞子形成スピンドル極体前胞子膜 GFP

项目摘要

分裂酵母の胞子細胞膜はスピンドル極体(SPB)が構造的に変化し、膜小胞が融合して新たに形成される。Spo7はSPBに局在し、前胞子膜形成開始に関わる新たな構成因子として取得した。Spo7は脂質の結合に機能することが知られているPHドメインを有していた。任意のタンパク質と脂質との結合を見るPIPストリップアッセイによりSpo7はホスファチジルイノシトール3リン酸(PI3P)と特異的な相互作用が見られた。PHドメインを欠失したspo7変異株では胞子を形成することが可能であったが、異常な形のものが見られた。この形質はmeu14変異株の形質と似ていた。Meu14は前胞子膜先端にリング状に局在し、前胞子膜形成が正常に伸長するために必要なタンパク質である。このタンパク質は第二減数分裂に核に現れ、いったんSPBに局在した後、最終的に前胞子膜先端に局在する。そこでSpo7とMeu14との関連を調べた。まず、Spo7はMeu14に先だってSPBに局在することがわかった。次にspo7破壊株でMeu14の局在を観察したところ、SPBに局在が見られなかった。逆にmeu14破壊株ではSpo7はSPBに局在した。Meu14とSpo7はYeast Two Hybrid法、免役沈降法、いずれも相互作用が見られた。このことから、Spo7はMeu14がSPBに局在するのに必須であることが明らかになった。PI3Pはホスファチジルイノシトール(PI)をPI3キナーゼがリン酸化することによって作られる。分裂酵母においてはPI3キナーゼとしてPik3が唯一知られている。pik3破壊株では異常な形の胞子が形成された。spo7のPHドメインを欠失させた変異株でもpik3破壊株と同じように異常な形の胞子ができた。以上のことから、Spo7は第二減数分裂にSPBに局在し、このときPI3Pと結合することによりMeu14と結合し、時空的に正確に前胞子膜形成を開始するのに働いている可能性が示唆された。

The structure of fission yeast's cell membrane, the polar body (SPB), is transformed, and the membrane cells are fused to form a new one. Spo7 is a new component of SPB, and the formation of pre-plasma membrane begins. Spo7 has a lipid-binding function and a functional function. Any のタンパク性とlipidとの合を见るPIPストリップアッセイによりSpo7はPI3P is a specific な-interaction product. PHドメインを无码したspo7変different strainsではsporesをformationすることがpossibleであったが、abnormal shapeのものが见られた. The shape and quality of このmeu14 is similar to that of different strains. In Meu14, the apex of the prespore membrane has a thin-shaped structure, and the normal elongation of the prestomembrane requires a certain amount of quality. The nucleus of the second meiotic division is now in the nucleus, the SPB is in the rear, and the final front end of the plasma membrane is in the center.そこでSpo7とMeu14とのrelatedを动べた.まず、Spo7はMeu14に前だってSPBにBureau in することがわかった. The game of にspo7 was broken by でMeu14 in を観看したところ, and the game of SPB was in が见られなかった. The reverse of meu14 is the result of Spo7 and SPB. Meu14とSpo7はYeast Two Hybrid method, immune sedimentation method, and interaction method.このことから、Spo7はMeu14がSPBにbureau in するのにMust be であることが明らかになった. PI3P Powder Powder Split yeast においてはPI3キナーゼとしてPik3がonly know られている. pik3 breaks the strain and creates abnormal spores. spo7のPHドメインをowed the missing させた変different strain でもpik3 the same strain じようにabnormal なshaped spores ができた. Above のことから、Spo7はSecond meiosisにSPBにBurning inし、このときPI3PとcombinationすることによThe combination of Meu14 and the correct formation of the plasma membrane in time and space indicates the possibility of starting the formation of the plasma membrane.