ゲノム規模での単離した分裂酵母の胞子形成必須遺伝子産物の時間・空間配置の解析

裂殖酵母孢子形成所必需的分离基因产物的时间和空间排列的基因组规模分析

• 批准号: 16013242
• 负责人: 下田 親
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16013242/
• 关键词: 分裂酵母; 減数分裂; 胞子形成; スピンドル極体; 小胞輸送; 膜融合

分裂酵母の胞子形成関連遺伝子産物を網羅的に解析するため、次の3項目の研究を行い成果をあげた。1)ゲノム規模での胞子形成関連遺伝子の網羅的単離と解析:われわれは減数分裂と濃い的な転写因子Mei4を発見し解析してきた。Mei4を栄養細胞で過剰発現したときに転写が誘導される遺伝子を網羅的にクローンすることを試みた。分裂酵母S.pombeの全ゲノムに存在する約4900個の遺伝子を対象にDNAマイクロアレイ解析を行った。その結果、341個の遺伝子で有意の転写上昇が見られた。次に、これらの遺伝子について英国サンガー研究所の転写プロファイル情報を検索し、減数分裂・胞子形成過程で転写が上昇する遺伝子として288個を抽出した。これらの遺伝子のORFをPCR増幅しほぼすべてをプラスミドのクローン化した。2)タンパク質間相互作用の解析:分裂酵母のスピンドル極体(SPB)が微小管形成のみならず、胞子細胞膜の基点として働くことを明らかにした。後者の機能に必須の3つのSPBタンパク質Spo2,Spo13,Spo15について、タンパク質間相互作用を酵母Two-hybridアッセイおよび免疫沈降実験により証明した。さらに、Spo13をベイトとしてcDNAライブラリーをTwo-hybridによりスクリーニングし、ホスホリパーゼ、ソーティングネキシンなどの候補タンパク質が得られた。3)胞子形成をモデルとして、細胞システム変換の基本原理を考察:栄養増殖から胞子形成の変換には、まず特異的転写因子の発現とその標的遺伝子の転写誘導が重要であることをMei4を中心に証明することができた。つぎに、これらの遺伝子産物の主に膜輸送による細胞内局在制御とタンパク質間相互作用による細胞内構造体形成が重要であることを示した。

The results of three research projects on the analysis of related daughter products of fission yeast 1) Separation and analysis of the network of related genes that must be formed by cells at the cell size: the Mei4 factor that governs meiosis and concentration is revealed and analyzed. Mei4, the first step in the development of the cell culture. There are about 4900 genes in the whole genome of S.pombe. The results, 341 of the children deliberately write rise to see the day. In addition, 288 genes were extracted from the genome of the British Institute of Molecular Biology. The ORFs of these genes were amplified and transformed into DNA. 2) Analysis of plasma-to-plasma interaction: the formation of microtubes in the splitting yeast, the formation of basic points in the spore cell membrane, and the formation of light cells. The function of the latter must be demonstrated by the three SPB molecules Spo2, Spo13, Spo15, the interaction between the SPB molecules and the SPB molecules, and the immune sedimentation. Spo13 is a Two-hybrid. It's a Two-hybrid. 3)The basic principles of cell transformation during the process of spore formation are investigated. The development of specific transcription factors and the transcription induction of target genes are important for the transformation of spore formation during the process of spore growth. The importance of intracellular regulation of plasma-to-plasma interactions in the transport of gene products to host membranes is demonstrated.

项目成果

酵母とその遺伝的改変

酵母及其基因改造

• 发表时间: 2004
• 期刊: 蛋白質核酸酵素 49(11)
• 作者: 下田 親;中村太郎;金子嘉信
• 通讯作者: 金子嘉信

The Sec14 family glycerophospholipid-transfer protein is required for structural integrity of the spindle pole body during meiosis

Sec14 家族甘油磷脂转移蛋白是减数分裂期间纺锤体极体结构完整性所必需的

• 发表时间: 2004
• 期刊: Genes Cells (Selected for cover illustration) 9(12)
• 作者: Nakase Y.;Nakamura T.;Okazaki;K.;Hirata;A.;Shimoda C.
• 通讯作者: Shimoda C.

第二減数分裂制御に関わる新しいCdc7/Dbf4キナーゼ複合体Spo4/Spo6

一种新的 Cdc7/Dbf4 激酶复合物 Spo4/Spo6 参与第二次减数分裂控制

• 发表时间: 2005
• 期刊: 実験医学 (印刷中)
• 作者: 中村太郎;淡路 萌;下田 親
• 通讯作者: 下田 親

Sorting nexin homologues are targets of phosphatidylinositol 3-phosphate in sporulation of Schizosaccharomyces pombe.

分选连接蛋白同源物是粟酒裂殖酵母孢子形成中磷脂酰肌醇 3-磷酸的靶标。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Genes to Cells 9(6)
• 作者: Koga;T.;Onishi;M.;Nakamura;Y.;Nakamura;T.;Shimoda;C.et al.
• 通讯作者: C.et al.

Characterization of O-mannosyltransferase family in Schizosaccharomyces pombe.

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2005.03.033
• 发表时间: 2005-05
• 期刊: Biochemical and biophysical research communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: N. Tanaka;Yasuko Fujita;Shotaro Suzuki;M. Morishita;Y. Giga‐Hama;C. Shimoda;K. Takegawa