超音波造影治療用バブルリポソームの開発および遺伝子導入ベクターへの応用

用于超声造影治疗的气泡脂质体的开发及其在基因转移载体中的应用

• 批准号: 16700392
• 负责人: 滝澤 知子
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16700392/
• 关键词: 超音波; リポソーム; 遺伝子導入; バブル; 造影剤

臨床応用可能な診断治療用製剤および遺伝子導入用ベクターの開発を目的とし、ガス内封リポソームを調製し、超音波併用による遺伝子導入効率の上昇について検討を行った。1)昨年に引き続きin vitroにおける遺伝子発現量の上昇を検討した。pDNAをカチオン性ポリマーと複合体を形成させたところ、単独で用いたときよりも発現量が低かったため、遺伝子は単独で用いることとした。種々の細胞において検討したところ、浮遊、接着いずれの細胞へも遺伝子導入可能であり、マウスおよびヒト由来癌細胞、血管内皮細胞において遺伝子発現量の著しい上昇が認められた。リポソーム構成脂質については、DSPCを基本組成としPEGを修飾したものにおいて最も高い発現量が得られた。2)臨床用超音波診断機を用いてマウスの心臓・血管などの造影を試みた。しかし、小動物での明瞭な像を得るのは困難であったため、現在、超音波高解像度生物顕微鏡による造影を検討中である。3)in vivoにおける遺伝子発現の検討を行った。マウス皮内投与において、in vitroと同様にPEG修飾リポソームにおいて最も高い発現を得た。超音波条件は、1MHzにおいて最も高い発現を示した。iv投与において、pDNAとバブルリポソームを投与後、直ちに肝臓または心臓に超音波(1MHz,1W/cm^2)を照射したところ、照射部位に限局した遺伝子発現が認められた。その発現量はバブルリポソームを用いない場合と比較して100倍から1000倍上昇していた。マウス腹水癌モデルにおいても、腹腔への超音波照射により腹水中の癌細胞へ効率よく遺伝子導入できた。以上、バブルリポソームと超音波照射の併用により効率良く遺伝子導入できることが確認され、照射部位選択的な遺伝子導入が可能であることを確認した。本バブルリポソームは、簡便かつ低侵襲性な新しい遺伝子導入ツールとして期待している。

Clinical application of diagnostic and therapeutic agents for the development of diagnostic and therapeutic agents for the introduction of diagnostic agents for the development of diagnostic and therapeutic agents for the introduction of diagnostic agents 1)The increase in the number of photons detected in the vitro was discussed last year. pDNA is a complex of DNA and DNA. The amount of gene expression in cells derived from cancer cells and vascular endothelial cells increased significantly. The basic composition of DSPC is modified by PEG. 2)Clinical use of ultrasound diagnostic equipment for cardiac and vascular imaging Small animals are difficult to understand, and ultrasound high-resolution biomicroscopy is difficult to detect. 3)In vivo detection and detection of DNA. In vitro and in vitro, PEG modification is the most effective way to achieve this goal. Ultrasonic conditions are at 1MHz and the highest frequency is detected. iv. The irradiation of ultrasound (1MHz,1W/cm^2) with pDNA is limited to the detection of DNA. The amount of light emitted by the light source increases from 100 times to 1000 times when compared with the light source. Ascites cancer cells in the abdominal cavity are irradiated with ultrasound, and cancer cells in the abdominal cavity are irradiated with ultrasound. The combination of ultrasonic irradiation with the above mentioned methods can effectively improve the efficiency of gene introduction and confirm the possibility of gene introduction by selecting the irradiation site. This flexible support tool is designed to facilitate the introduction of new and low-invasive genetic proteins into the body and look forward to it.