NBS1依存性相同組換えの放射線生物影響における意義

NBS1 依赖性同源重组在放射生物学效应中的意义

• 批准号: 16710032
• 负责人: 坂本 修一
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16710032/
• 关键词: 相同組換え; DNA二本鎖切断; 放射線感受性; 高発がん性; NBS; BRCA1; BRCA2

16年度は、NBS1がDSB修復でのHRにおいて作用する機構の解析をHR測定カセットDRGFPを用いて行った。<NBS1のHRにおける機能ドメインの同定>NBS患者由来繊維芽細胞株を正常NBS1 cDNAにより相補したところ、放射線感受性とHR能が共に回復したことから、ヒト細胞においてもNBS1がHRに重要であることが判った。次に、種々の変異型NBS1 cDNAを作成し、一過的に発現させてHR頻度を測定することでHR修復に重要なNBS1の機能ドメインを検索したところ、N末端のFHA及びBRCTドメインとC末端のMIE11結合ドメインがHRに重要であることが明らかになった。また、ATMによりリン酸化される部位はHRには必須ではないことも判明した。これらの結果から、NBS1はMRE11/RAD50複合体をDSB周辺のクロマチンヘリクルートすることによりHRに機能すること、ATM非依存的に機能できることが示唆された。<他のHR因子との関連性の検討>HR修復に作用する家族性乳癌原因遺伝子産物BRCA1及びBRCA2とNBS1との機能関連を調べるために、BRCA1及びBRCA2のdominant-negative(DN)体を作成した。NBS細胞とその相補細胞は、BRCA1及びBRCA2のDN体によってそれぞれ同程度HR能が抑制されたことから、NBS1とBRCA1及びBRCA2はHR修復において独立して作用することが示唆された。

In 2016, NBS1 and DSB repair HR function analysis mechanism were used to determine HR function and DRFP function. NBS 1 is derived from a cell line with normal NBS1 cDNA, and radiation sensitivity and HR activity are associated with recovery. NBS1 cDNA was generated, and HR frequency was determined. The N-terminal FHA and BRCT MIE11 binding sites were important for HR repair. Moreover, it is clear that the parts that are acidified in ATM are not necessary for HR. NBS1 is the MRE11/RAD50 complex. It is a DSB peripheral function. It is an ATM independent function. The functional relationship between BRCA1 and BRCA2 and NBS1 is modulated by the dominant-negative(DN) body of BRCA1 and BRCA2. NBS cells and their complementary cells have the same degree of inhibition of HR activity as BRCA1 and BRCA2, and NBS1 and BRCA1 and BRCA2 have independent effects on HR repair.