RNAウイルスの復製に関与する宿主翻訳伸長因子の普遍的・多様的機能の解析

RNA病毒复制中宿主翻译延伸因子的普遍性和多样性功能分析

• 批准号: 17780033
• 负责人: 山次 康幸
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17780033/
• 关键词: 飜訳伸長因子1A; ウイルス; 翻訳伸長因子1A; Mドメイン

昨年度はEFの主要成分である翻訳伸長因子1A (eEF1A)がTobacco mosaic virus (TMV)のウイルス複製酵素ならびにゲノムRNAの双方と相互作用することを明らかにした。引き続き今年度はRNAウイルスの複製に関与する宿主翻訳伸長因子の普遍的・多様的機能について解析するために、モデルウイルスであるTMVを用いて以下の解析を行った。(1)ウイルスベクターを用いたVIGSによるeEF1A発現抑制の確認eEF1Aの機能を明らかにすることを目的とし、ウイルスベクターを用いて特定のmRNAを特異的に発現抑制(サイレンシング)するVIGS(virus-induced gene silencing)を試みた。PVXベクターを用いたVIGSによりNicotiana bendzamianaにおけるeEF1Aをサイレンシングしたところ、著しい媛化症状を示した。特に茎部において強い壊死が観察されたが、葉においては全体的に退緑する傾向があるものの茎部と違って激しい壊死が起こることはなく、葉に奇形などの形態異常は認められなかった。またノーザンプロッティングによりeEF1Aの顕著な発現抑制を確認した。(2)eEF1Aサイレンシング組織におけるウイルス増殖量の比較VIGS法によりeEF1Aをサイレンシングした葉にTMVを接種し、その蓄積量を調べたところ、eEF1Aサイレンシング区では対照区に比べTMV RNA蓄積量が減少した。さらにウイルスの広がりを可視化する目的で緑色蛍光タンパク質(GFP)を発現するレポーターウイルス、TMV-GFPを接種に用いたところ、TMV-GFPによる蛍光斑の面積は対照区と比較してeEF1Aサイレンシング区において著しく縮小した。従って、eEF1AのサイレンシングによりTMVの蓄積が抑制されることが示された。以上を要するに、eEF1AはTMVの複製酵素ならびにウイルスRNAに結合し、ウイルス感染に密接に関わる因子であると考えられた。既知の知見と併せ、翻訳伸長因子が動植物を通じてRNAウイルスの複製等に深く関わる可能性が示唆された。

Last year, the main components of EF were transformed into elongation factor 1A (eEF1A), Tobacco mosaic virus (TMV), copy enzyme, enzyme, RNA, and the interaction between the two parties. In this year's RNA, we need to make a copy of this year's host growth factor. This year, we will use the following data to analyze the TMV. (1) do not use the VIGS to check the eEF1A. Confirm that the eEF1A machine is able to verify that the target is correct, and that the specific mRNA signature is used to suppress the VIGS (virus-induced gene silencing) test. PVX patients use the words "VIGS", "Nicotiana bendzamiana", "eEF1A", "she", "she". Special attention should be paid to the strength of the stem and the whole body of the stem. The whole body will show that the stem is dead. I need to know that the eEF1A is suppressed and that the confirmation is checked. (2) the population of eEF1A was much lower than that of TMV and eEF1A was less than that of TMV RNA. The purpose of this paper is to make sure that the color distribution system (GFP) can be used to determine the size of the surface area of the light spot, which is more sensitive than that of the eEF1A system. The results show that the radiation area is smaller than that of the eEF1A system. Check, eEF1A, check, check, TMV, suppress, suppress, display, check, check. The following information is required: eEF1A, TMV, copy enzyme, RNA, RNA, infection, infection, factor, enzyme, and so on. Knowing that it is possible to know that animals and plants are affected by RNA growth factors, such as the possibility of instigation and instigation, such as the possibility of plant growth and growth.

项目成果

A single amino acid in the RNA-dependent RNA polymerase of Plantago asiatica mosaic virus contributes to systemic necrosis

车前子花叶病毒RNA依赖性RNA聚合酶中的单个氨基酸导致系统性坏死

• 发表时间: 2006
• 期刊: Archives of Virology 151
• 作者: Ozeki;J.;Takahashi;S.;Komatsu;K.;Kagiwada;S.;Yamashita;K.;Mori;T.;Hirata;H.;YamaJi;Y.;Ugaki;M.;Namba;S.
• 通讯作者: S.

In vivo interaction between Tobacco mosaic virus RNA-dependent RNA polymerase and host translation elongation factor 1A.

• DOI: 10.1016/j.virol.2005.11.031
• 发表时间: 2006-03
• 期刊: Virology
• 影响因子: 3.7
• 作者: Y. Yamaji;Toshihiko Kobayashi;K. Hamada;K. Sakurai;A. Yoshii;Masashi Suzuki;S. Namba;T. Hibi

A single amino acid residue of RNA-dependent RNA polymerase in the Potato virus X genome determines the symptoms in Nicotiana plants.

• DOI: 10.1016/j.virusres.2004.12.006
• 发表时间: 2005-06
• 期刊: Virus research
• 影响因子: 5
• 作者: S. Kagiwada;Y. Yamaji;K. Komatsu;Shuichiro Takahashi;Takuma Mori;H. Hirata;Masashi Suzuki;M. Ugaki-M.

Phylogenetic characteristics, genomic heterogeneity and symptomatic variation of five closely related Japanese strains of Potato virus X

• DOI: 10.1007/s11262-005-2205-z
• 发表时间: 2005-08-01
• 期刊: VIRUS GENES
• 影响因子: 1.6
• 作者: Komatsu, K;Kagiwada, S;Namba, S
• 通讯作者: Namba, S

The efficiency of interference of Potato virus X infection depends on the target gene

马铃薯X病毒感染的干扰效率取决于目标基因

• 发表时间: 2006
• 期刊: Virus Research 116
• 作者: Ozeki;J.;Takahashi;S.;Komatsu;K.;Kagiwada;S.;Yamashita;K.;Mori;T.;Hirata;H.;Yamaji;Y.;Ugaki;M.;Namba;S.;Takahashi et al.
• 通讯作者: Takahashi et al.