宿主細胞核内に局在する日本脳炎ウイルスコア蛋白質の機能解明

定位于宿主细胞核的日本脑炎病毒核心蛋白的功能阐明

• 批准号: 17780229
• 负责人: 森 嘉生
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17780229/
• 关键词: 日本脳炎ウイルス; コア蛋白質; カテプシンL; 宿主蛋白質; 分子ウイルス学

我々はこれまでに、日本脳炎ウイルス(JEV)のコア蛋白質がヌクレオキャプシド形成に関与するだけでなく、一部が核へ移行してJEVが哺乳動物細胞で複製するために重要な役割を演じていることを報告した。また、感染細胞にはウイルス粒子に取り込まれる成熟型コア蛋白質よりも小さなコア蛋白質が検出されることを明らかにした。今回、感染細胞に検出される低分子量コア蛋白質の産生機構を解析した。JEVコア蛋白質のプロセシングに関与する宿主由来酵素を同定するため、JEVの感染細胞とコア蛋白質発現細胞における、蛋白質分解酵素に対する阻害剤やsiRNAの影響を検討した。また、精製コア蛋白質の蛋白質分解酵素によるin vitroでの切断を確認した。さらに、低分子量コア蛋白質の一次構造を検討するため、種々の変異を導入したコア蛋白質を作製した。低分子量コア蛋白質の産生は、システインプロテアーゼ阻害剤(E-64d)、カテプシンL特異阻害剤{Z-FY(t-Bu)-DMK}の添加やカテプシンLに対するsiRNAの導入によって顕著に抑制された。また、カテプシンLの過剰発現によって、低分子量コア蛋白質の産生が促進された。さらに、コア蛋白質は精製カテプシンLによってinvitroで切断されたが、精製カテプシンBでは切断されなかった。また、両末端にエピトープタグを導入したコア蛋白質を発現させると、C末端エピトープによって低分子量コア蛋白質は検出されたが、N末端エピトープでは検出されなかった。さらに、コア蛋白質の17、18および19位のアミノ酸がこのプロセッシングに重要であった。JEV感染細胞において、カテプシンLがコア蛋白質のN末端近傍を切断することが示唆された。JEVコア蛋白質がカテプシンLによってプロセスされる生物学的意義は現在のところ不明であるが、コア蛋白質の多彩な機能を制御している可能性がある。

My 々はこれまでに, Japanese 脳inflammatory ウイルス (JEV) のコアprotein がヌクレオキャプシド formed に关 and するだけでなく, 一がNUCLEAR へ Migration してJEV が Mammalian cells で REPLICATION するためにimportant なservice cut を performance じていることをreport した.また, infected cells にはウイルス particles にtake り込まれる mature type コア eggs White matter よりも小さなコアprotein が検出されることを明らかにした. This time, we will analyze the production mechanism of low-molecular-weight protein in infected cells. JEV's protein and host-derived enzymes are the same as those of JEV's infected cells. It is a protein that appears in cells and a proteolytic enzyme that blocks the influence of siRNA.また, purified コアproteinのproteolytic enzyme によるin vitroでのcutをconfirmationした.さらに, low molecular weight コアprotein の primary structure を検するため, species 々の変different を introduction したコアprotein を した. Low molecular weight コアprotein production は, システインプロテアーゼ inhibitor (E-64d), カテプシンL specific inhibitor {Z -FY(t-Bu)-DMK}のAdd やカテプシンL に対するsiRNAのIntroduce によって顕与に suppress された.また, カテプシンLの excessive 剰発appears によって, low molecular weight コアprotein のstimulation された.さらに, コアprotein は purified カテプシンL によってinvitro で cut されたが, purified カテプシンB では cut されなかった.また、両Terminal にエピトープタグをIntroduction したコアprotein を発行させると、C-terminal エピトープThe low molecular weight コアprotein is は検出されたが, and the N-terminal エピトープでは検出されなかった.さらに, コアproteinの17, 18および19-bit のアミノ acid がこのプロセッシングにimportant であった. In JEV-infected cells, the N-terminus of the JEV-infected cell is cut off near the N-terminus of the protein. JEVコアproteinがカテプシンLによってプロセスされるBiological significanceはNowのところUnknown であるが, コアprotein のColorful なfunction をcontrol しているpossibility がある.

项目成果

Critical role of PA28{gamma} in hepatitis C virus-associated steatogenesis and hepatocarcinogenesis

PA28{gamma} 在丙型肝炎病毒相关脂肪形成和肝癌发生中的关键作用

• 发表时间: 2006
• 期刊: Proceedings of the National Academy of Sciences 50
• 作者: Moriishi;K.;Mochizuki;R.;Moriya;K.;Miyamoto;H.;Mori.Y.;Abe;T.;Murata;S.;Tanaka;K.;Miyamura;T.;Suzuki;T.;Koike K.;Matsuura;Y.
• 通讯作者: Y.

Nucleolar protein B23 interacts with Japanese encephalitis virus core protein and participates in viral replication

• DOI: 10.1111/j.1348-0421.2006.tb03789.x
• 发表时间: 2006-01-01
• 期刊: MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
• 影响因子: 2.6
• 作者: Tsuda, Y;Mori, Y;Matsuura, Y
• 通讯作者: Matsuura, Y