权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

OSTα/βの薬物・内因性物質の輸送特性および発現調節機構の解析

OSTα/β的药物/内源性物质转运特性及表达调控机制分析

基本信息

批准号：
17790114
负责人：
高田龍平
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

Organic solute transporter(OST)α/βは、小腸での高い発現・FXR/RXRαによる発現制御の可能性から、小腸血管側膜における硫酸抱合体・胆汁酸トランスポーターであることが期待される。本研究課題は、OSTα/βの輸送特性および発現特性の解析を行い、生理的機能および輸送基質の体内動態への寄与を解明することを目的としている。本年度は、OSTα/β遺伝子発現細胞系を用いた輸送実験、および、OSTα/βの転写調節機構の詳細な解析を行った。昨年度までに得られた非極性細胞(HEK293細胞)・極性細胞(MDCK細胞)へのOSTα/β遺伝子安定発現株を用い、[^3H]タウロコール酸の輸送実験を行った結果、OSTαとOSTβを同時発現した場合に有意な細胞内取り込み活性の上昇が見られた。これらの細胞におけるトランスポーター蛋白の発現はウェスタンブロットにより確認され、免疫染色の結果、同時導入時において細胞膜上での発現が観察された。転写調節に関しては、5'-上流域を用いたレポータージーンアッセイ・ゲルシフトアッセイの結果により、FXR/RXRα/ケノデオキシコール酸(FXRリガンド)による発現制御はOSTα・OSTβの上流に存在するIR-1配列を介した直接的なものであることが明らかとなった。また、LXRα/RXRα/TO-901317(LXRリガンド)によってもOSTα・OSTβは発現誘導されることが示され、この誘導はFXR/RXRαと同じIR-1配列を介したものであることが見出された。LXRリガンドによるOSTα/βの発現誘導は、内因性のOSTα/β(in vitro(Caco-2細胞)・in vivo(マウス小腸))においても確認されており、胆汁うっ滞等の遺伝性疾患の治療にも結びつきうる臨床的にも重要な知見であると考えられる。

Organic solution transporter(OST)α/βは、small intestineでの高い発 appear・FXR/RXRαによる発出账速度のpossibilityから、Small intestinal vascular lateral membraneにおけるSulfuric acid complex・Bile acidトランスポーターであることがLooking forward to itされる. This research topic includes analysis and analysis of the transport characteristics of OSTα/β, and analysis of the physiological functions of the transport matrix and in vivo dynamics of the transport matrix. This year, a detailed analysis of the regulation mechanisms of OSTα/β genetic material and OSTα/β genetic code was carried out using cell lines. Last year, we obtained non-polar cells (HEK293 cells) and polar cells (MDCK cells) and used them for OSTα/β remaining stable and stable strains, [^3 H]タウロコールAcid transport 実験を行った results, OSTα and OSTβを appear at the same time, the occasion is intentional, and the intracellular activity of り込み is increased, and the activity is increased.これらのCRELL Confirm the results of immunostaining and immunostaining, and detect the presence of spots on the cell membrane when introduced simultaneously.転WRITING ADJUSTMENTSゲルシフトアッセイのRESULTにより、FXR/RXRα/ケノデオキシコーFXR リガンド) による発在线播放 OSTα・OSTβの高に尊In するIR-1, the direct なものであることが明らかとなった is arranged.また、LXRα/RXRα/TO-901317(LXRリガンド)によってもOSTα・OSTβは発 is now inducedされることがshows され, このinducing FXR/RXRαと Same as IR-1 arrangement を Introduction したものであることが见出された. LXR リガンドによるOSTα/β is now induced, endogenous OSTα/β(in vitro(Caco-2 cells)・in vivo(マウスsmall intestine))においてもConfirmation of the remaining items including bile stagnation, etc. The treatment of sexual disorders is important in clinical practice.