肝臓の初期発生および成熟段階における液性因子・細胞外マトリクスの関与

体液因子和细胞外基质参与肝脏早期发育和成熟阶段

基本信息

批准号：
17790435
负责人：
紙谷聡英
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

1.胚性幹細胞(ES細胞)・胎児肝幹細胞を用いた成熟肝細胞分化誘導系の構築マウスES細胞から胚様体を形成しHGF,OSMで刺激することでCYP7a1などの肝細胞特異的マーカー遺伝子の誘導が可能である。一方で、胎児期の肝臓には増殖性の高い肝幹・前駆細胞が存在する。そこで、これら幹細胞の増殖・分化を制御する因子の探索を行なった。その結果、ホメオボックス転写因子Prox1の強制発現によって、マウス胎生肝幹細胞の長期増殖・運動性が誘導されること、逆に、Prox1と結合する転写因子Lrh1が、肝幹細胞の増殖を抑制することを見出した。さらにProx1の強制発現によって、細胞周期のG1-S期の移行を制御するサイクリンの発現が誘導された。興味深いことに、Prox1によってサイクリンインヒビターの中でP16^<ink4a>のみが特異的に抑制された。そこで現在、ES細胞からの肝細胞分化系におけるProx1の機能を解析するために、RNAiによるノックダウンシステムを構築している。2.成体肝臓からの幹細胞分離と試験管内分化・増殖系の構築マウス正常肝臓を分散しFACSセルソーターを用いて細胞分画しコロニーアッセイを行った結果、CD49f^+CD45^-Ter119^-Scal^-c-Kit^-画分(肝非実質細胞画分の約0.09%)中に低密度培養でコロニーを形成する幹細胞様細胞が存在することがわかった。このコロニーは、アルブミンやαフェトプロテインといった初期肝細胞マーカーや胆管細胞マーカーcytokeratin19が発現しており二方向性の分化能を示し、幹細胞・前駆細胞の形質を示す。その一方で、成熟肝細胞特異的酵素群の発現は見られず未成熟な細胞集団と推測される。

1。通过胚胎干细胞（ES细胞）和胎儿肝干细胞诱导成熟的肝细胞分化的系统，通过从小鼠ES细胞中形成胚胎体并用HGF和OSM刺激肝细胞特异性标记基因（例如CYP7A1）。另一方面，胎儿肝脏含有高度增殖的肝干和祖细胞。因此，我们搜索了调节这些干细胞增殖和分化的因素。结果，我们发现强迫表达同型转录因子Prox1诱导小鼠胚胎肝干细胞的长期增殖和运动，相反，该结合ProX1的转录因子LRH1抑制了肝干细胞的增殖。此外，Prox1强迫表达诱导细胞周期蛋白的表达，从而调节细胞周期的G1-S相变。有趣的是，仅Prox1在细胞周期抑制剂中特别抑制了P16^<ink4a>。因此，我们目前正在使用RNAi构建敲低系统，以分析来自ES细胞的肝细胞分化系统中ProX1的功能。 2。干细胞与成人肝脏的分离以及体外分化和增殖系统的结构。将小鼠正常肝脏分散并使用FACS细胞分类器分离细胞，并进行菌落测定。发现发现在CD49F^+CD45^-TER119^-Scal^-c-kit^-Fraction中形成菌落的干细胞样细胞（大约0.09％的肝脏分数的0.09％）存在于Cd49f^+cd45^-scal^-scal^-cal^-cit^-kit^-kit^-kit^-kit non-nnon-0.09％中（大约0.09％）细胞分数）。该菌落表达早期的肝细胞标记物，例如白蛋白和α-五蛋白质和胆管细胞标记细胞标记细胞角蛋白19919，表现出双向分化潜力，表明茎和祖细胞。另一方面，未观察到成熟的肝细胞特异性酶的表达，并且假定它是未成熟的细胞群体。

项目成果

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专利数量（0）

Direct electrochemical detection of sodium azide in physiological saline buffers using highly boron-doped diamond electrodes

DOI：
10.1016/j.snb.2006.03.003
发表时间：
2007-01
期刊：
Sensors and Actuators B-chemical
影响因子：
8.4
作者：
Akane Suzuki;T. Ivandini;Akihide Kamiya;S. Nomura;Mikito Yamanuki;K. Matsumoto;A. Fujishima;Y. Einaga
通讯作者：
Akane Suzuki;T. Ivandini;Akihide Kamiya;S. Nomura;Mikito Yamanuki;K. Matsumoto;A. Fujishima;Y. Einaga