肝臓の初期発生および成熟段階における液性因子・細胞外マトリクスの関与

体液因子和细胞外基质参与肝脏早期发育和成熟阶段

• 批准号: 17790435
• 负责人: 紙谷 聡英
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790435/
• 关键词: 発生・分化; 再生医学; 肝臓病学; 肝幹細胞; 細胞外マトリクス; Hepatocyte Nuclear Factor; オンコスタチンM

1.胚性幹細胞(ES細胞)・胎児肝幹細胞を用いた成熟肝細胞分化誘導系の構築マウスES細胞から胚様体を形成しHGF,OSMで刺激することでCYP7a1などの肝細胞特異的マーカー遺伝子の誘導が可能である。一方で、胎児期の肝臓には増殖性の高い肝幹・前駆細胞が存在する。そこで、これら幹細胞の増殖・分化を制御する因子の探索を行なった。その結果、ホメオボックス転写因子Prox1の強制発現によって、マウス胎生肝幹細胞の長期増殖・運動性が誘導されること、逆に、Prox1と結合する転写因子Lrh1が、肝幹細胞の増殖を抑制することを見出した。さらにProx1の強制発現によって、細胞周期のG1-S期の移行を制御するサイクリンの発現が誘導された。興味深いことに、Prox1によってサイクリンインヒビターの中でP16^<ink4a>のみが特異的に抑制された。そこで現在、ES細胞からの肝細胞分化系におけるProx1の機能を解析するために、RNAiによるノックダウンシステムを構築している。2.成体肝臓からの幹細胞分離と試験管内分化・増殖系の構築マウス正常肝臓を分散しFACSセルソーターを用いて細胞分画しコロニーアッセイを行った結果、CD49f^+CD45^-Ter119^-Scal^-c-Kit^-画分(肝非実質細胞画分の約0.09%)中に低密度培養でコロニーを形成する幹細胞様細胞が存在することがわかった。このコロニーは、アルブミンやαフェトプロテインといった初期肝細胞マーカーや胆管細胞マーカーcytokeratin19が発現しており二方向性の分化能を示し、幹細胞・前駆細胞の形質を示す。その一方で、成熟肝細胞特異的酵素群の発現は見られず未成熟な細胞集団と推測される。

1. Embryonic stem cells (ES cells), fetal liver stem cells を where use い た mature hepatocyte differentiation induction is の build マ ウ ス ES cells か ら を embryo others body formation し HGF, OSM で stimulus す る こ と で CYP7a1 な ど の liver cell specific マ ー カ ー heritage 伝 son の may induce が で あ る. On one side, で and in the fetal 児 stage, the <s:1> liver に is highly proliferative <s:1>, and the <s:1> liver stem · pre-駆 cells が are present する. Youdaoplaceholder0 で で, <s:1> れら stem cell <s:1> proliferation and differentiation を control of する factors <e:1> exploration を line なった. そ の results, ホ メ オ ボ ッ ク ス planning write factor Prox1 の forced 発 now に よ っ て, マ ウ ス viviparous liver stem cells の long-term rights colonization, motility induced さ が れ る こ と, inverse に, Prox1 と combining す る planning write factor Lrh1 が を の raised colonization, liver stem cells inhibit す る こ と を shows し た. さ ら に Prox1 の forced 発 now に よ っ て の, cell cycle stage G1 -s の transitional を suppression す る サ イ ク リ ン の 発 now が induced さ れ た. Fun deep い こ と に, Prox1 に よ っ て サ イ ク リ ン イ ン ヒ ビ タ ー の で of P16 ^ < ink4a > の み が specific に inhibit さ れ た. そ こ で now, ES cells か ら の liver cell differentiation is に お け る Prox1 の function analytical す を る た め に, RNAi に よ る ノ ッ ク ダ ウ ン シ ス テ ム を build し て い る. 2. Adult liver viscera か ら の と stem cell separation test tube to differentiate, raised colonization is の build マ ウ ス normal liver viscera を scattered し both FACS セ ル ソ ー タ ー を with い て cells points draw し コ ロ ニ ー ア ッ セ イ を line っ た results, CD49f CD45 ^ + ^ - Ter119 ^ - Scal Kit ^ - ^ - c - draw points (liver not draw points の about be stromal cells In 0.09%, に low-density culture でコロニ を を を formed する stem cell-like cells が present する とがわ とがわ った った. こ の コ ロ ニ ー は, ア ル ブ ミ ン や alpha フ ェ ト プ ロ テ イ ン と い っ た early hepatocellular マ ー カ ー や bile duct cells マ ー カ ー cytokeratin19 が 発 now し て お り two directional differentiation can を の し, stem cells, former 駆 の character を す. Youdaoplaceholder0 そ one side で, mature hepatocellular specific enzyme groups are present そ seen られず immature な cell clusters と, suggesting される.

项目成果

Direct electrochemical detection of sodium azide in physiological saline buffers using highly boron-doped diamond electrodes

• DOI: 10.1016/j.snb.2006.03.003
• 发表时间: 2007-01
• 期刊: Sensors and Actuators B-chemical
• 影响因子: 8.4
• 作者: Akane Suzuki;T. Ivandini;Akihide Kamiya;S. Nomura;Mikito Yamanuki;K. Matsumoto;A. Fujishima;Y. Einaga

Identification and differentiation of hepatic stem cells during liver development

• DOI: 10.2741/1884
• 发表时间: 2006-05-01
• 期刊: FRONTIERS IN BIOSCIENCE-LANDMARK
• 影响因子: 3.1
• 作者: Kamiya, A;Gonzalez, FJ;Nakauchi, H
• 通讯作者: Nakauchi, H