着床前期胚における甲状腺刺激ホルモンの直接作用に関する検討

促甲状腺激素对着床前胚胎直接影响的研究

• 批准号: 17791101
• 负责人: 河村 和弘
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Akita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791101/
• 关键词: 甲状腺刺激ホルモン; 甲状腺刺激ホルモン受容体; 着床前期胚; 胚発育

1.TSHの受精卵への直接作用を検討するため、過排卵刺激を行ったマウスを交配させ、2細胞期胚を採取した。得られた2細胞期胚に各濃度のTSHを添加し受精卵の経時的発育を検討した。高濃度のTSHは受精卵の発育を抑制し、特に桑実胚期以降の発育を抑制した。胚盤胞での細胞数計測では、高濃度のTSHは内細胞塊、栄養膜外胚葉層の細胞数をともに減少させた。2.TSHによる受精卵の発育抑制にアポトーシスの発生が関与しているかどうか、caspase-3 assayおよびTUNEL法にて検討したところ、高濃度のTSHは胚盤胞のcaspase-3陽性細胞を増加させ、TUNEL染色細胞を増加させた。従って、高濃度のTSHは胚盤胞のアポトーシスを誘導することが明らかとなった。3.これらのTSHによる作用が受精卵に発現しているTSHRを介したものかどうかを検討するため、RNAiにより授精卵のTSHRの発現抑制を試みた。RNAiの導入はzygoteへのマイクロインジェクションによって行った。マウスTSHRに対する良い抗体が存在せず、RNAiによるTSHRの発現抑制の検証は、RNAレベルでの定量により行った。RNAiによりTSHR mRNAの発現量が抑制された胚盤胞では、高濃度TSHによる発現抑制・アポトーシス誘導効果が低下した。以上より、高濃度のTSHはその特異的受容体を介して、胚盤胞の発育抑制・アポトーシスの誘導作用を持つことが明らかとなった。

1. TSH の fertilized egg へ の direct action を beg す 検 る た め line, ovulation stimulation を っ た マ ウ ス を mating さ せ, 2 cell stage embryos を take し た. To obtain られた 2-cell stage embryos, に at various concentrations of <s:1> TSHを, and then add the grafted fertilized egg <s:1> for long-term development を検 to obtain <s:1> た. High-concentration <s:1> TSH <e:1> inhibits the <s:1> development of fertilized eggs を, and に inhibits the <s:1> development of embryos from the embryonic stage onwards を inhibits <s:1> た. The number of で <s:1> cells in the blastoderm was measured to be で で, the number of cells in the high-concentration <s:1> TSH <e:1> inner cell mass, and the number of <s:1> cells in the extramedocyst layer outside the 栄 nutrient membrane decreased させた. 2. TSH に よ る fertilized egg の 発 yukon inhibit に ア ポ ト ー シ ス の 発 raw が masato and し て い る か ど う か, caspase 3 assay お よ び TUNEL method に て beg し 検 た と こ ろ, high concentration の TSH は blastoderm cell の caspase 3 positive cells を raised plus さ せ を raised, TUNEL staining cells with さ せ た. Youdaoplaceholder0 and high-concentration <s:1> TSH <s:1> blastocyst <s:1> アポト シスを シスを シスを induce する する とが とが and ら ら となった となった. 3. こ れ ら の TSH に よ る role が fertilized egg に 発 now し て い る TSHR を interface し た も の か ど う か を beg す 検 る た め, RNAi に よ り insemination eggs の TSHR の 発 inhibit を now try み た. RNAi <s:1> imports the line った of った zygoteへ へ ロ ロ ロ ロ ジェ ジェ ショ によって によって によって によって った. Good マ ウ ス TSHR に す seaborne る い antibody が exist せ ず, RNAi に よ る TSHR の 発 now inhibit の 検 は, RNA レ ベ ル で の quantitative に よ り line っ た. Amount of RNAi に よ り TSHR mRNA の 発 now が inhibit さ れ た blastoderm cell で は, high levels of TSH に よ る 発 now, inhibit ア ポ ト ー シ ス induced low working fruit が し た. Above よ り, high concentration の TSH は そ の specific by let body を interface し て, blastoderm cell の 発 yukon, inhibit ア ポ ト ー シ ス の entrainment を hold つ こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

Tumor necrosis factor regulation of apoptosis in mouse preimplantation embryos and its antagonism by transforming growth factor alpha/phosphatidylionsitol 3-kinase signaling system

• DOI: 10.1095/biolreprod.106.058008
• 发表时间: 2007-04-01
• 期刊: BIOLOGY OF REPRODUCTION
• 影响因子: 3.6
• 作者: Kawamura, Kazuhiro;Kawamura, Nanami;Tanaka, Toshinobu
• 通讯作者: Tanaka, Toshinobu