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Analyses of testicular autoimmunity by the use of transplantation of lymphocytes and germ cells

淋巴细胞和生殖细胞移植分析睾丸自身免疫

基本信息

批准号：
17591704
负责人：
ITO Masahiro
金额：
$ 2.57万
依托单位：
Tokyo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17591704/
关键词：
移植 AutoMACS Green Mouse busulfan SCID 精細管マウス

项目摘要

2005-2007 年度まで、自作のインジェクション装置「ガスバーナーでガラス管(1.0×90mm、Narishige 社)に熱を加えて、萎縮した精細管に移植可能な外径約50um」を作成し、精細管内あるいは精巣網内注入法を確立した。また、C57BL/6jマウスおよび先天的に生殖細胞を欠いているw/wマウスに、蛍光緑発色するグリーンマウス(=C57BL/6-Tg(CAG/Acr-EGFP)C3-No1-FJ002Osb : 精子を含むすべての細胞が蛍光緑発色するマウス)の生殖細胞を移植する実験を試み、移植3ヵ月後に移植されたマウスの精細管中に蛍光緑発色の細胞が散在(生着)することを観察しました。2008年度は、C57BL/6jマウスをブスルファン(45mg/kg)処理し、精細管内の生殖細胞を欠失させた後に、それらマウス精巣へのSDラットの精祖細胞移植を行い、異種の移植細胞の生着または拒絶の比較解析を検討した。その結果、移植3ヶ月後マウスの精細管中にラットの生殖細胞が生着し分化することを観察した。また、移植されたマウスの精巣上体から精子を抽出してsmear sectionを作成し、成熟したラットとマウスの両方のspermatozoaを確認した。ブスルファン処理されたマウスの精巣と異なり、マウス内因性精子形成もある程度回が観られた。現在、ラット生殖細胞のnudeあるいはscidマウスの精巣への移植による生殖細胞分化の研究が盛んに行われているが、本年度の研究の結果より、免疫正常マウスでも、ラットの生殖細胞の生着ができ、正常に分化・成熟することが分かった。さらに、ブスルファン処置後ラットの生殖細胞移植された精巣には、ラットの精子形成のみならず、マウス自身の精子形成も再生することが明らかとなった。

In 2005-2007, the self-made fine tube injection method was established for the production of a fine tube (1.0×90mm, Narishige) with a possible diameter of about 50um due to heat addition and shrinkage. C57BL/6J is a natural germ cell.(= C57BL/6-Tg(CAG/Acr-EGFP)C3-No1-FJ002 Osb : Sperm containing cells that emit light green) Germ cells are transplanted 3 months after transplantation, and light green cells are scattered in sperm tubules. In 2008, C57BL/6J was used to treat sperm cells (45mg/kg). After the sperm cells were lost, the sperm progenitor cells were transplanted into the sperm cells and the survival of xenograft cells was analyzed. 3 months after transplantation, the germ cells in the sperm tubules were differentiated. The sperm is extracted from the sperm and the sperm is extracted from the sperm. The process of sperm formation is different. The results of this year's research show that the germ cells are immune normal, the germ cells are normal, and the germ cells are normal. The sperm cell transplantation after the treatment of sperm cell transplantation is the first step in the process of sperm formation and regeneration.