ヒストン複合体から迫るクロマチン形成と維持の分子機構

组蛋白复合物揭示染色质形成和维持的分子机制

• 批准号: 17687016
• 负责人: 田上 英明
• 金额: $ 19.72万
• 依托单位: Nagoya City University (2006)Nagoya University (2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17687016/
• 关键词: ヒストン複合体; クロマチン制御; クロマチン形成; ヒストンシャペロン

本研究はヒストン複合体解析を通してクロマチン形成やエピジェネティック情報維持の詳細な分子機構、さらにヒストンメタボリズムを含めたダイナミックなクロマチン制御の解明を目指すものであり、平成18年度は以下の点を中心に解析を進めた。これまでに、出芽酵母、分裂酵母において、FLAG/HAエピトープタグを付加したヒストン遺伝子株を構築し、各種ヒストン複合体を精製することに成功し、出芽酵母、分裂酵母、ヒトでヒストンH3/H4複合体の構成因子が異なることを見いだしている。特に、分裂酵母ヒストンH3複合体の主要構成因子の1つとして同定したMlo2は大量発現により染色体分配異常を引き起こす機能不明のタンパク質であった。現在、Mlo2複合体の精製、解析を進めることで、ヒストンメタボリズム制御との関連性を明らかにする予定である。また、分裂酵母ではG2期が長いという特徴を持っており、細胞周期制御とヒストン複合体のダイナミクスとの関連性が示唆される。しかし現在までのところ、分裂酵母cdc10温度感受性変異株にタグを付加したピストンH3を導入し、同調培養条件でのピストン複合体精製を行ったが、顕著な違いは見られていない。今後、一過的な相互作用についても細胞固定によるヒストン複合体スナップショット系を確立する。細胞周期制御やタンパク量制御に焦点を当てて機能解析を進めた結果、ピストン遺伝子の3'UTR領域の新たな機能を見出した。また、大量発現による複合体形成異常など複合体解析の技術的な問題点が明らかとなってきた。今後、それらの問題を解決するとともに、複合体構成因子を欠失させた時に各ヒストンの核内での挙動や複合体構成因子自身のダイナミクスについて免疫染色/GFP融合ヒストンによるイメージングおよびChIP法などの生化学的手法を組み合わせることによりさらに解析を進める予定である。

This study focuses on the molecular structure of complex analysis, the formation of complex information, and the analysis of complex information. The results showed that the composition factors of budding yeast, splitting yeast, FLAG/HA complex, H3/H4 complex and H3/H4 complex were different. The main components of the H3 complex in particular, split yeast, and Mlo2 were found in large quantities, resulting in abnormal chromosome distribution and unclear function. Now, the purification and analysis of Mlo2 complex are in progress. The relationship between cell cycle regulation and G2 phase characteristics of mitotic yeast is demonstrated. The temperature sensitive mutant strain of yeast cdc10 was introduced into the culture medium under the condition of homology and the complex was refined. In the future, a series of interactions between cells and complex systems will be established. Cell cycle control, quantitative control, focus analysis, results, novel functions in the 3'UTR domain The problem of complex analysis technology is obvious. In the future, the problem of complex components will be solved. When the components of the complex are missing, the nuclear motion of each component and the components of the complex themselves will be determined by immunostaining/GFP fusion.

项目成果

The histone variant macroH2A1.2 is mono-ubiquitinated at its histone domain

组蛋白变体 MacroH2A1.2 在其组蛋白结构域处单泛素化

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biochemical and Biophysical Research Communications 14
• 作者: Yuya Ogawa;Tatsuya Ono;Yuka Wakata;Katsuya Okawa;Hideaki Tagami;Keiichi Shibahara
• 通讯作者: Keiichi Shibahara

A human T-Cell lymphotropic virus type 1 enhancer of Myc transforming potential stabilizes Myc-TIP60 transcriptional interactions

• DOI: 10.1128/mcb.25.14.6178-6198.2005
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
• 影响因子: 5.3
• 作者: Awasthi, S;Sharma, A;Harrod, R
• 通讯作者: Harrod, R

How is epigenetic information on chromatin inherited after DNA replication?

DNA复制后染色质的表观遗传信息如何遗传？

• 发表时间: 2006
• 期刊: The histone code and beyond (Ernst Schering Res Found Workshop) 57
• 作者: Yoshihiro Nakatani;Hideaki Tagami;Elena Shestakova
• 通讯作者: Elena Shestakova

From the view of histone complexes : A sketch of molecular players on the chromatin assembly events.

从组蛋白复合物的角度来看：染色质组装事件中分子参与者的草图。

• 发表时间: 2006
• 期刊: DNA Structure, Chromatin and Gene Expression (Transworld Research Network) 37
• 作者: Yoshihiro Nakatani;Hideaki Tagami;Elena Shestakova;Hideaki Tagami
• 通讯作者: Hideaki Tagami

Protein tagging at rare codons is caused by tmRNA action at the 3' end of nonstop mRNA generated in response to ribosome stalling.

稀有密码子上的蛋白质标记是由响应核糖体停滞而生成的不间断 mRNA 3 端的 tmRNA 作用引起的。

• 发表时间: 2006
• 期刊: RNA 12
• 作者: Xia Li;Reiko Hirano;Hideaki Tagami;Hiroji Aiba
• 通讯作者: Hiroji Aiba