ヒストン複合体から迫るクロマチン構造制御の分子基盤

控制组蛋白复合物染色质结构的分子基础

• 批准号: 17054015
• 负责人: 田上 英明
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17054015/
• 关键词: ヒストン複合体; クロマチン形成; ヒストンシャペロン

申請者はヒト培養細胞において世界で初めてクロマチン形成装置をヒストン複合体として精製することに成功した(Cell,2004)。17年度においては、クロマチン形成の分子基盤と、その戦略のバリエーションについて解析する目的で、酵母をモデル系としてヒストン複合体を精製し、以下の解析を行った。出芽酵母、分裂酵母において、FLAG/HAエピトープタグを付加したヒストン遺伝子株を構築し、各種ヒストン複合体を精製することに成功した。驚いたことに、出芽酵母、分裂酵母、ヒトでヒストンH3/H4複合体の構成因子が異なることを見いだし、現在、これらの違いからクロマチン形成の共通の分子基盤と戦略のバリエーションについて、細胞周期制御やタンパク量制御に焦点を当てて機能解析を進めているところである。また、タンパク質総量としてはほとんど同じにもかかわらず、細胞抽出液から精製されるヒストンH2A-H2B量は、H3-H4に比較して10倍以上多いことが明らかとなった。さらに、出芽酵母H2A-H2B複合体にはヒストンシャペロンNap1以外にFACT(Spt16、Pob3)が含まれることが明らかとなった。FACTはもともとクロマチン転写伸長を促進する因子として同定されたが、最近ヒストンH2A-H2Bをヌクレオソームから除くことが示唆されている。抽出されるH2A-H2B量の多さとFACTとの結合は、出芽酵母における遺伝子発現量とヒストンダイナミクスの関連性を示唆するものと思われ、現在in vitro系の構築を含めて解析を進行中である。

The applicant succeeded in culturing cells in the first place and forming a device to purify them (Cell,2004). In 2017, for the purpose of analyzing the molecular basis for the formation of colonies and the development of strategies, the yeast complex was refined and the following analysis was carried out. budding yeast, splitting yeast, FLAG/HA, etc. The common molecular basis for the formation of H3/H4 complex is the analysis of cell cycle control, cell cycle control and quantitative control. The amount of H2A-H2B in the cell extract was more than 10 times that of H3-H4. In addition, budding yeast H2A-H2B complex contains FACT(Spt16, Pob3) except Nap1. FACT is the most important factor in the development of the new technology. The amount of H2A-H2B extracted, the combination of FACT and budding yeast, the amount of DNA produced, the relationship between them, and the construction of a vitro system are in progress.

项目成果

The histone variant macroH2A1.2 is mono-ubiquitinated at its histone domain

组蛋白变体 MacroH2A1.2 在其组蛋白结构域处单泛素化

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biochemical and Biophysical Research Communications 14
• 作者: Yuya Ogawa;Tatsuya Ono;Yuka Wakata;Katsuya Okawa;Hideaki Tagami;Keiichi Shibahara
• 通讯作者: Keiichi Shibahara

A human T-Cell lymphotropic virus type 1 enhancer of Myc transforming potential stabilizes Myc-TIP60 transcriptional interactions

• DOI: 10.1128/mcb.25.14.6178-6198.2005
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
• 影响因子: 5.3
• 作者: Awasthi, S;Sharma, A;Harrod, R
• 通讯作者: Harrod, R