新たな作用メカニズムに基づく食品成分中のホルモン依存性癌予防因子に関する研究

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エストラジオール(E2)は、CYPIB1によりカテコールエストロゲンの一つである4-OHE2に変換され、そのキノン体がDNAアダクトを形成し、動物実験において発癌性を示すことが明らかにされている。ヒト乳癌組織中では正常乳腺組織に比べ、CYPIB1の発現が亢進し4-OHE2およびキノン-GSH抱合体の含量が3倍程度高いことが報告されている。本研究では、4-OHE2の生成・解毒代謝に着目し、CYP1B1を特異的に阻害する因子をメトキシフラボノイドより検索し、乳癌細胞MCF-7におけるエストロゲン代謝への影響について検討したところ、以下の結果を得た。(1)CYP1A1/IB1に対する酵素阻害作用を検討した結果、3種の化合物にCYP1B1に特異的な阻害活性が認められた。中でも化合物Xは、最も低濃度(IC50=0.028μM)で阻害を示した。(2)CYP1A1/1B1マイクロゾーム溶液とE2の混合液中の2-OHE2および4-OHE2の生成について、GC/MS分析したところ、2-OHE2の生成量に変化はなかったが、4-OHE2は化合物X添加時に大幅に減少した。細胞培養液中のE2代謝物分析では、2-OCH_3E2の生成には影響を与えず、4-OCH_3E2の生成のみ抑制した。また化合物Xは、catechol-θ-methyltransferase(COMT)活性を阻害しなかった。(3)化合物Xは、ERE-GFP-MCF-7を用いたERへの結合試験において、弱いアゴニスト作用を示したが、アンタゴニスト作用は示さなかった。また、S.cerevisiae YCM3を用いたAhRへの結合試験においてアゴニストおよびアンタゴニスト両作用は認められなかった。(4)ヒト乳癌細胞の培養液中に、ホルモン補充療法に用いられるプレマリンの主成分であるエキレニン、および化合物Xを添加し数日間培養後、細胞よりDNAを抽出した。現在、エキレニン-DNAアダクトの定量を行い、化合物Xのアダクト形成への影響について検討中である。