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独自の三次元培養法を利用したES細胞チップの開発と肝細胞分化誘導の研究

独特三维培养法ES细胞芯片开发及肝细胞分化诱导研究

基本信息

批准号：
17760628
负责人：
中澤浩二
金额：
$ 2.18万
依托单位：
The University of Kitakyushu
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、ES細胞の効率的な分化誘導条件を評価するための新しいアッセイツールとして、基板上でES細胞をパターニング・アレイ化させたES細胞チップを開発することを目的とする。本年度は、二種類のES細胞チップの開発を行うとともに、試作したチップを用いてES細胞の挙動を従来技術と比較した。(1)ES細胞チップの開発二種類のES細胞チップを開発した。一つはマイクロコンタクトプリンティング法を利用して、数百個の細胞接着スポット(ゼラチン)がパターンされ、その他の表面が非細胞接着分子(ポリエチレングリコール)で修飾されたスポット型チップ基板を作製した。もう一方は、微細加工技術と表面修飾技術を利用して、直径数百ミクロンのマイクロキャビティを数百個有し、その表面が非細胞接着分子(ポリエチレングリコール)で修飾されたキャビティ型チップ基板を作製した。マウスES細胞を培養した結果、両チップ基板とも均一な粒径のES胚様体が高密度にアレイ化できる細胞チップであることが示された。また、スポット型ES細胞チップは、チップ上で一連の分化誘導操作を連続して評価できるチップとして使用でき、キャビティ型ES細胞チップは、ES胚様体を大量作製し回収する操作に優れるチップであることが示された。(2)試作ES細胞チップによる細胞挙動の評価試作ES細胞チップを用いて、未分化維持因子(LIF)非存在下におけるES細胞の挙動を従来のハンギングドロップ法と比較し、その有効性を評価した。その結果、チップ上のES細胞は肝細胞、心筋細胞、血管細胞、神経細胞などに分化し、その分化の方向性は従来のハンギングドロップ法と同様であった。これより、本チップは分化誘導研究に利用することができることが示された。現在、本チップを用いて特定の機能細胞への分化誘導研究に取り掛かっている。

In this study, the differentiation conditions of ES cell cycle rate are different from each other. In this study, the differentiation of cell cycle rate in ES cells was studied in this study. in this study, the differentiation of cell cycle rate in ES cells was studied in this study. in this study, the differentiation conditions of cell cycle rate in this study and the differentiation of cell cycle rate in this study were studied. This year, two kinds of ES cell operators will conduct a technical comparison with each other through the use of ES cell phones. (1) the ES cell will open two kinds of ES cell registration programs. As soon as possible, hundreds of cells are used to make use of this method to make sure that the non-cellular molecules on the surface of the cells are connected to the molecules on the surface of the machine. The surface repair technology of one-side and micro-machining technology is used to repair the substrate of several hundred non-cellular molecules on the surface of the machine, which is hundreds of centimeters in diameter and several hundred centimeters in diameter. The results of ES cell culture, the results of substrate culture, the uniform particle size of ES embryo, the high-density cell culture, the substrate, the cell culture, the The ES cells of type I and type B are not affected, and the operation of differentiation guidance is linked. The operation is linked to the number of cells of the type of ES, the type of cell of the virus, and the body of the ES embryo. (2) in the absence of the presence of undifferentiated maintenance factor (LIF) and the presence of undifferentiated maintenance factor (LIF), the ES cell cycle was used as the ES cell cycle, and the undifferentiated maintenance factor (LIF) was used in the absence of the cell cycle. According to the results, the ES cells, liver cells, heart cells, vascular cells, brain cells, differentiation cells, and the direction of differentiation were analyzed. In the study of differentiation, we will make use of the information to show you how to do the differentiation. At present, we are using the research on the differentiation of specific machine-specific machines.