葉緑体ATP合成酵素の活性調節機構の解明

叶绿体ATP合酶活性调控机制的阐明

• 批准号: 18870006
• 负责人: 紺野 宏記
• 金额: $ 1.68万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18870006/
• 关键词: 葉緑体; ATP合成酵素; 酸化還元調節; 活性制御

εサブユニットのC末端ヘリックスを削除したATP合成酵素を含む形質転換株の作出まず、C末端側ヘリックス部分を欠いた変異εサブユニットの遺伝子および薬剤耐性遺伝子を挿入したプラスミドを作製した。次に、相同組換えによって上記プラスミドを光合成遺伝子の破壊が可能なsynecocystis sp. PCC 6803に導入し、εサブユニットのC末端ヘリックスを削除したATP合成酵素を含む形質転換株の作出に成功した。このようにして作成した形質転換株の増殖能を様々な光条件下で野生株と比較している。葉緑体ATP合成酵素(CF_oCF_1)に見られる酸化・還元調節機構の解明CF_oCF_1の酸化・還元調節領域を導入したシアノバクテリアF_1(BP-1redox)を作成し、このF_1のATP加水分解活性が酸化・還元調節を示すことを確認した。次に、回転観察を行う上で必要なシステインのF1への導入を行った。酸化・還元調節領域もシステインを含んでおり、F1の回転観察を行うには酸化・還元調節領域上のシステインはそのままで、他のシステインのみをビオチンマレイミド修飾する必要があった。様々な条件を調べ、特定のシステインのみをビオチンマレイミド修飾することができた。現在、このF1を用い、酸化・還元調節によりF1分子の回転がどのように変化するかを観察中である。

The C-terminal part of the enzyme is removed from ATP synthase, and the C-terminal part of the enzyme is removed from ATP synthase. In addition, it is possible to introduce and delete ATP synthase into PCC6803 by using syncystis sp. The growth and reproduction of these plants were compared with those of wild plants under light conditions. Chloroplast ATP synthase (CF_oCF_1) was introduced into the acidification/reduction regulatory domain of CF_oCF_1, and the ATP hydrolysis activity of F_1 was confirmed. The second time, the second time, the third time. In addition, F1 and F2 are the key elements in the acidification and reduction regulation domain, and F1 and F2 are the key elements in the acidification and reduction regulation domain. The conditions are adjusted, and the specific conditions are adjusted. Now, the F1 gene is used, acidified, and regulated.