シュードモナスシリンゲ菌の病原性におけるべん毛運動能とバイオフィルム形成の役割

モデル病原細菌Pseudomonas syringae pv. tabaci(タバコ野火病菌)6605では、0.5%寒天培地上におけるswarming運動能が、本菌の病原性の強さと正の相関関係を示すことが見いだされている。本研究では動物病原細菌でswarming運動能や病原性・バイオフィルム形成に必要な遺伝子として見いだされているppk (polyphophate kinase)遺伝子に着目した。これまでに、P. syringae pv. tabaciの近縁種のP. syringae pv. phaseolicola l448Aのゲノム情報を参考にppk遺伝子を単離し、塩基配列を解読後にppk遣伝子の内部に欠損を導入し、接合法、相同性組換え法により、ppk遺伝子欠損株Δppkを作出した。Δppk変異株のpolyphosphate量は、野生株の0.1-0.2%程度にまで著しく減少した。さらに、Δppk変異株ではswarming運動能、アシルホモセリンラクトンの生産量、高温処理や過酸化水素などの物理的刺激に対する耐性が低下し、宿主タバコに対する病原性も大きく低下した。従って、本変異株は、植物に接種した場合に、侵入能力が低下し、植物の防御応答により生産される活性酸素に高い感受性を示すため、発病能力が低下したと判断した。これらの研究成果は本年度イタリアで開催されたMolecular Plant-Microbe Interactions国際学会において発表した。また、国際学術誌に投稿し、審査員の指摘により本変異株の遺伝子相補株の作出を試みている。相補株の作出にはpDSK519を用いたプラスミドによる相補と、pBSL118を用いるトランスポゾンによる相補の2つの方法で試みたが、得られた相補候補株においてpolyphosphate量の回復は観察されなかった。現在その原因を探り、試験終了時までの論文受理を目指している。

モデル病原細菌Pseudomonas syringae pv. tabaci(タバコ野火病菌)6605では、0.5%寒天培地上におけるswarming運動能が、本菌の病原性の強さと正の相関関係を示すことが見いだされている。本研究では動物病原細菌でswarming運動能や病原性・バイオフィルム形成に必要な遺伝子として見いだされているppk (polyphophate kinase)遺伝子に着目した。これまでに、P. syringae pv. tabaciの近縁種のP. syringae pv. phaseolicola l448Aのゲノム情報を参考にppk遺伝子を単離し、塩基配列を解読後にppk遣伝子の内部に欠損を導入し、接合法、相同性組換え法により、ppk遺伝子欠損株Δppkを作出した。Δppk変異株のpolyphosphate量は、野生株の0.1-0.2%程度にまで著しく減少した。さらに、Δppk変異株ではswarming運動能、アシルホモセリンラクトンの生産量、高温処理や過酸化水素などの物理的刺激に対する耐性が低下し、宿主タバコに対する病原性も大きく低下した。従って、本変異株は、植物に接種した場合に、侵入能力が低下し、植物の防御応答により生産される活性酸素に高い感受性を示すため、発病能力が低下したと判断した。これらの研究成果は本年度イタリアで開催されたMolecular Plant-Microbe Interactions国際学会において発表した。また、国際学術誌に投稿し、審査員の指摘により本変異株の遺伝子相補株の作出を試みている。相補株の作出にはpDSK519を用いたプラスミドによる相補と、pBSL118を用いるトランスポゾンによる相補の2つの方法で試みたが、得られた相補候補株においてpolyphosphate量の回復は観察されなかった。現在その原因を探り、試験終了時までの論文受理を目指している。