エンドウカルコン合成酵素遺伝子の病原菌シグナルによる発現制御機構

病原菌信号对豌豆查耳酮合酶基因表达调控机制

• 批准号: 06760050
• 负责人: 一瀬 勇規
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06760050/
• 关键词: エリシター; サプレッサー; カルコン合成酵素; CHS; フェニルアラニンアンモニアリアーゼ; PAL; 遺伝子発現; 転写制御因子

エリシターによりエンドウCHS遺伝子の転写誘導に必要なDNAシス領域を同定するために、まず、様々な長さのPSCHS1、PSCHS2遺伝子5´上流域をレポーター遺伝子であるクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)遺伝子に結合させてキメラ遺伝子を構築した。次に、これらのキメラ遺伝子をエンドウ培養細胞由来のプロトプラストにエレクトロポレーション法で導入して、一時的なCATの活性を測定した。この時エレクトロポレーション後にエリシター処理を行う区と行わない区を設けてエリシター処理による影響も解析した。その結果、PSCHS1では少なくとも-242から下流に、PSCHS2では-377から下流にエリシター応答性転写活性領域が存在することが明らかとなった。更にCaMVの35Sミニマルプロモーターを用いたgain of function実験からPSCHS1の-242から-181までの61塩基だけでエリシターに応答してレポーター遺伝子の発現を増高させることが明らかになった。次に、両遺伝子の転写制御に関わる核内タンパク質因子について、ゲルシフトアッセイ法により解析した。その結果、PSCHS1の-242から-181の61塩基の断片やPSCHS2の-347から-158までの189塩基の断片はエリシター処理エンドウ組織から調製された核タンパク質と強く結合して移動度の遅い複合体(LMC)を形成することが明らかとなった。LMCの形成は核タンパク質を予めアルカリフォスファターゼで前処理することによって阻害されたことから、LMCの形成にはリン酸化が必要であると考えられる。また、エリシターで転写が誘導されるエンドウのPSPAL1とPSPAL2のプロモーターにも同様なLMCを形成する領域が存在しており、それぞれのLMCの形成は互いにLMCを形成するDNA断片により競合することが明らかにされた。以上の結果から、エリシターによる防御遺伝子の転写誘導にはLMCを形成する共通因子が関与している可能性が示唆された。

PSCHS1 and PSCHS2 genes were identified in the same region as those of CHS gene, and the gene expression of CHS gene was determined in the same region. The activity of CAT was determined by the method of introducing the protein into the culture cells. The analysis of the influence of the time and space on the behavior of the human body As a result, PSCHS1 has a low flow rate of-242, PSCHS2 has a low flow rate of-377, and PSCHS2 has a low flow rate of-377. In addition, CaMV's 35S micro-channel gain of function was achieved from PSCHS1 to-242 to-181 and the occurrence of micro-channel was increased. Next, we will analyze the core quality factors of the gene and the gene control system. As a result, PSCHS1 - 242,-181,-61,-347,-158,-189,-188,-189,-180,-18 The formation of LMC is necessary to prevent the formation of LMC. The DNA fragments of PSPAL1 and PSPAL2 are induced by DNA fragmentation, and the LMC fragments of PSPAL1 and PSPAL2 are induced by DNA fragmentation. The above results indicate that the common factors related to the formation of LMC are related to the formation of LMC.

项目成果

K.Nasu et al.: "Suppression of the activation of chitinase and β-1,3-glucanase in pea epicotyls by endogenous suppressor from Pisum sativum." Ann.Phytopath.Soc.Lapan. (in press). (1995)

K.Nasu 等人：“豌豆上胚轴中几丁质酶和 β-1,3-葡聚糖酶的激活受到 Ann.Phytopath.Soc.Lapan 的抑制”（1995 年出版）。

T.Shiraishi,et al.: "Suppressors:Determinants of specificity produced by plant pathogens." Plant Cell Phisiol.35. 1107-1119 (1994)

T.Shiraishi 等人：“抑制因子：植物病原体产生的特异性的决定因素。”

白石友紀: "病原菌シグナルと植物の防御応答" 日本農芸化学会誌. 69(印刷中). (1995)

Yuki Shiraishi：“病原体信号和植物防御反应”，日本农业化学学会杂志 69（出版中）。