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タンパク質ジスルフィド結合導入酵素における電子伝達制御機構

蛋白质二硫键引入酶中的电子传递控制机制

基本信息

批准号：
06J03077
负责人：
高橋洋平
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

タンパク質にジスルフィド架橋を導入する仕組みについて、化学機構とその立体構造にもとづく作動原理を解明した。ジスルフィド結合形成が、細胞で効率よく起こるためには特異的な装置による助けが必要である。大腸菌のDsbAは、直接基質タンパク質のシステインペアを酸化する可溶性ペリプラズム酵素である。我々は以前に、呼吸鎖成分がDsbB機能に必須であることを発見し、BardwellらはユビキノンがDsbBを直接活性化することを示した。我々はキノンはDsbBのCys41-Cys44ペアを特異的に強く酸化すること、DsbBに結合したキノンが電子状態の遷移をおこし、ピンク色(λmax=500nm、ユビキノンの場合)あるいはすみれ色(λmax=550nm、メナキノンの場合)に発色することを発見した。この現象は、DsbBによるDsbA酸化反応中に一過的にみられ、Cys44が還元・チオレート状態となることが原因である。理論化学シミュレーションの結果、Cys44チオレートとユビキノンが電荷移動錯体を形成し、DsbBのArg48の正電荷によって安定化されていることが示され、さらにCys44とユビキノン間に共有結合・付加生成物が生じることも予測された。結晶構造解析により、Cys41,Cys44,Arg48の近傍にユビキノンのキノン環が配置された「ジスルフィド結合創生の反応中心」を同定した。Cys44-キノン電荷移動錯体・付加生成物がCys41による求核攻撃を誘起することによって、Cys41-Cys44ジスルフィド結合が創生されるとの化学メカニズムが強く示唆される。

The equipment is introduced into the organization and the chemical institutions are responsible for the explanation of the operation principle of the equipment. The combination of the equipment and the cell rate is very important to help the necessary equipment. The fungus DsbA, the direct substrate, the enzyme, the enzyme, the acidifier, the acid, the soluble enzyme, the enzyme. In the past, the respiratory components of the DsbB machine must be activated directly. The Bardwell machine must be activated directly. We do not want to change the color of the DsbB and Cys41-Cys44 devices. We use the combination of the DsbB and the electronic devices to change the color of the device, the color (λ max=500nm), the color of the device (λ max=550nm, the color of the device), the color of the device, and the color of the device. In the reverse acidizing process of DsbA acidizing, there is a significant difference in the status of DsbA acidizing and Cys44 acidization. in the process of acidizing, there is a significant difference in the status of acid. This paper discusses the results of the chemical analysis, the formation of the charge transfer error of the Cys44, the positive charge transfer of the DsbB, the stabilization of the charge, the thermal analysis of the Cys44, the combination of the products and the production of the product. Based on the results, the results show that there is a close relationship between the distribution of the environment, the environmental configuration, the environmental protection, the environment, the environment and the environment. The product of Cys44- charge transfer plus the product, Cys41, nuclear attack, and Cys41-Cys44, in combination with the chemical laboratory of health care, strongly indicates that it is instigated.