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RNAiライブラリーを用いたメタボリック症候群関連遺伝子の網羅的解析と全容の解明

利用RNAi文库全面分析和阐明代谢综合征相关基因

基本信息

批准号：
06J09887
负责人：
松本佐保姫
金额：
$ 2.18万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

メタボリック症候群は、耐糖能異常や高脂血症、高血圧などを合併し、その上流に共通した発症基盤として肥満を有する病態と考えられ、動脈硬化性疾患の原因として注目されている。その発症を制御する新規因子を高効率にスクリーニングする方法を確立し、機能解析を行ってきた。昨年度までは、In Cell Analyzerを用いて、効率よくイメージング画像を取得し高速解析する技術を確立することによって、RNAiライブラリーを用いたin vitroでのスクリーニングを可能とした。本年度は、このスクリーニングでピックアップされた興味深いいくつかの遺伝子の中で、RAD51というDNA修復遺伝子に注目して解析を行った。RAD51はDNA修復蛋白あるいは相同組み換え関連蛋白として知られ、肥満との関わりについては今までまったく指摘されていない。RAD51をノックダウンすることにより、3T3L1細胞の脂肪化は著しく抑制された。一方で、RAD51遺伝子の発現は、3T3L1の分化の初期に増強し、BrdUアッセイ、FACS解析などの結果、3T3L1のclonal expansionにおいてG2-Mチェックポイントで細胞周期を制御していることが明らかになった。この働きは、インスリン刺激によって誘導され、脂肪細胞の分化に関連して起きる現象であることが示された。RAD51のin vivoでの働きを解析してみると、肥満したob/obマウスの白色脂肪細胞で有意に増強していることが示され、RAD51^<+/->では、高脂肪食負荷で太りにくいことが示された。またRAD51^<+/->は、高脂肪食下で耐糖能異常やインスリン抵抗性の優位な改善を示した。これらの結果から、RAD51は、分化に強調した細胞分裂を制御し、その結果として肥満やそれに伴う代謝異常に関与していることが示唆された。

The causes of atherosclerosis include abnormal glucose tolerance, hyperlipidemia, hypertension, and common disease. The new regulation factor of the disease control system is used to establish the method of high efficiency and function analysis. In the past, in the use of Cell Analyzer, the technology of high speed analysis has been established. This year, we will focus on the analysis of DNA repair genes in RAD51. RAD51 is a DNA repair protein. It's the same group of proteins. It's a protein that's involved in DNA repair. RAD51 cells were inhibited from lipidation. One side, RAD51 gene development, 3T3L1 differentiation early stage enhancement, BrdU failure, FACS analysis results, 3T3L1 clonal expansion in the middle of G2-M cell cycle control in the middle of the second. This phenomenon is related to adipocyte differentiation. RAD51 in vivo analysis, fat, ob/ob, white fat cells intentionally increased, RAD51^<+/->, high fat load, too. RAD51^<+/-> showed improvement in glucose tolerance and resistance under high fat diet. The results of RAD51 and RAD52 differentiation are highlighted in the control of cell division, and the results are associated with metabolic abnormalities.