メンブレントラフィックの調節における低分子量GTP結合蛋白質ARFとRabの共役

Rab 与小 GTP 结合蛋白 ARF 偶联调节膜运输

• 批准号: 06J40052
• 负责人: 高橋 千絵
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J40052/
• 关键词: メンブレントラフィック; FIP3; FIP4; Rabll; ARF6; 細胞質分裂; Arfophilin

リサイクリングエンドソームを介する輸送に関与するRabllと、細胞膜付近でエンドサイトーシスやアクチン細胞骨格のリモデリングなどを調節するARF6の両方と相互作用する蛋白質FIP3とFIP4は、小胞輸送の調節において極めて重要な役割を果たすが、その生理的機能はほとんど不明である。本研究は、2種類の低分子量GTPase(RabllとARF6)と共役するFIP3とFIP4の機能を分子レベルで解析し、細胞内輸送における役割を解明することを目的として行った。具体的には、以下のような実験を行った。1.FIP3およびFIP4に対するポリクローナル抗体の作製2.FIP3およびFIP4の安定発現細胞株の樹立3.FIP3およびFIP4の細胞内局在4.ARF,Rabllのドミナント・ネガティブ変異体によるFIP3,FIP4の細胞内局在の変化5.RNAi法によるRabllとARF6のノックダウン6.Yeast Two Hybrid法による結合蛋白質の検索7.細胞質分裂時のFIP3およびFIP4の局在変化本実験を通して、以下のことが明らかになった。1.2種類の低分子量GTPase(RabllとARF6)と相互作用するFIP3とFIP4の局在は,Rabllによりリサイクリングエンドソームにリクルートされる。2.FIP3またはFIP4がリサイクリングエンドソームに局在することで,Rabllは膜で安定化する。3.細胞質分裂時には、FIP3とFIP4は2つの娘細胞の中心体付近から細胞間の橋状構造やFlemming bodyに局在する。4.細胞質分裂の際にもFIP3とFIP4はRabllとよく共局在した。これらの結果は、FIP3あるいはFIP4がRabllと相互作用することによってリサイクリングエンドソームに局在し、リサイクリングエンドソームの機能(局在)を調節する可能性を示唆する。現在、以上の内容をまとめて、論文を執筆中である。

リ サ イ ク リ ン グ エ ン ド ソ ー ム を interface す る conveying に masato and す る Rabll と, cell membrane paying nearly で エ ン ド サ イ ト ー シ ス や ア ク チ ン cells bone の リ モ デ リ ン グ な ど を adjust す る ARF6 の struck party と interaction す る protein FIP3 と FIP4 は, vesicular transport の adjust に お い て め extremely important な て "を cut fruit た す The physiological functions of が, そ, である are unknown である. This study は, 2 species の low molecular weight GTPase (Rabll と ARF6) と す total service る FIP3 と FIP4 の function を molecular レ ベ ル で analytical し, intracellular delivery に お け cut を る service interpret す る こ と を purpose と し て line っ た. The specific に に, the following is the ような experiment を line った. 1. FIP3 お よ び FIP4 に す seaborne る ポ リ ク ロ ー ナ ル 2. The antibody の cropping FIP3 お よ び FIP4 の settle 発 cell lines の set up 3. Now FIP3 お よ び FIP4 bureau in 4. の cell ARF, Rabll の ド ミ ナ ン ト · ネ ガ テ ィ ブ - variant に よ る FIP3, FIP4 の cells inside bureau in の - 5 . RNAi method に よ る Rabll と ARF6 の ノ ッ ク ダ ウ ン 6. Yeast Two Hybrid method に よ る binding protein の 検 line 7. During cytoplasmic division, <s:1> FIP3およびFIP4 <s:1> local changes を general <s:1> て, the following <s:1> とが とが indicates ら になった になった になった. 1.2 kinds の low molecular weight GTPase (Rabll と ARF6) と interaction す る FIP3 と FIP4 の bureau in は Rabll に よ り リ サ イ ク リ ン グ エ ン ド ソ ー ム に リ ク ル ー ト さ れ る. 2. FIP3 ま た は FIP4 が リ サ イ ク リ ン グ エ ン ド ソ ー ム に bureau in す る こ と で, Rabll は membrane で stabilization す る. 3. During cytoplasmic division, に に, FIP3と, FIP4 と, 2, <s:1>, the <s:1> centrosome of the female cell is attached to the nearly ら ら intercellular <s:1> bridging structure やFlemming bodyに is located at する. 4. Cytoplasmic division <s:1> interline に た FIP3とFIP4 と Rabllとよく co-located at た た. こ れ ら の results は, FIP3 あ る い は FIP4 が Rabll と interaction す る こ と に よ っ て リ サ イ ク リ ン グ エ ン ド ソ ー ム に bureau in し, リ サ イ ク リ ン グ エ ン ド ソ ー ム の function (bureau) を adjust す を る possibility in stopping す る. Now, the above <s:1> content をまとめて, the paper を is being written である.

项目成果

The E3 Ubiquitin Ligase LNX1p80 Down Regulates Claudins from Tight Junctions in MDCK cells

E3 泛素连接酶 LNX1p80 下调 MDCK 细胞中紧密连接的 Claudins

• 发表时间: 2008
• 作者: Senye Takahashi;et al.
• 通讯作者: et al.

Recruitment of Tom1 L1/Srcasm to endosomes and the midbody by Tsg101

Tsg101 将 Tom1 L1/Srcasm 招募到内体和中体

• 发表时间: 2008
• 期刊: Cell Struct.Funct. 33
• 作者: Yanagida-Ishizaki;Y.;et al.
• 通讯作者: et al.

低分子量GTPaseによるリサイクリングエンドソーム機能と細胞質分裂の調節

低分子量 GTP 酶调节再循环内体功能和胞质分裂

• 发表时间: 2008
• 作者: 中山和久;高橋千絵;武井朋美;高津宏之;申惠媛
• 通讯作者: 申惠媛

The E3 ubiquitin ligase LNX1 downregulates claudins from tight junctions in MDCK cells

E3 泛素连接酶 LNX1 下调 MDCK 细胞中紧密连接的紧密连接蛋白

• 发表时间: 2008
• 作者: 高橋千絵;ら
• 通讯作者: ら

The E3 ubiquitin ligase LNX1p80 downregulates claudins from tight junctions in MDCK cells

E3 泛素连接酶 LNX1p80 下调 MDCK 细胞中紧密连接的紧密连接蛋白

• 发表时间: 2008
• 作者: Noriko Iwamoto;Senye Takahashi;et al.
• 通讯作者: et al.