Analysis of the mechanism of septin polymerization and depolymerization

septin聚合与解聚机理分析

• 批准号: 18370077
• 负责人: KINOSHITA Makoto
• 金额: $ 11.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18370077/
• 关键词: biomolecule; protein; cell; tissue; brain; nervous system; cytoskeleton; reconstirution; live imaging; knockout mouse; ライブイメージング; ノックアウトマウス; 光退色後蛍光回復法; マススペクトロメトリー; 電子顕微鏡; 生化学

セプチン系の分子動態解析を目的として、生化学的解析、超微形態解析に加えて培養神経細胞の細胞膜直下に集積したGFP-septin融合蛋白質に対するFRAP(光退色後蛍光回復)法を行った。膜蛋白質分子や細胞膜直下のアクチン分子に比べてセプチン分子のターンオーバーは緩慢であり、細胞膜直下のセプチン集合体の安定性が示唆された。この特性は細胞膜形状の保持や、膜蛋白質のスカフォールドないし拡散障壁としての役割に適したものと考えられる。RNAiでセプチンを枯渇させた細胞で関連分子の動態を調べたところ、cortical actinの動態に有意な変化が見られない条件で、syntaxin-1(膜貫通型tSNARE)やGLASTのターンオーバーが有意に促進した。したがって、細胞膜直下のセプチン系がこれらの分子のスカフォールドないし拡散障壁として局在や安定化に寄与する可能性が支持された。生化学的解析、超微形態解析に関する論文は現在執筆中である。

The FRAP(Light Recovery After Decoloration) method was used for molecular dynamic analysis of human brain cells, biochemical analysis, ultra-morphological analysis, and direct accumulation of GFP-septin fusion proteins in cultured human brain cells. The stability of membrane protein molecules and cell membrane aggregates is slower than that of cell membrane molecules. These characteristics include the maintenance of cell membrane shape, membrane protein structure, and diffusion barrier. The dynamics of RNAi and cortical actin are intentionally modified by conditions such as syntaxin-1(membrane-penetrating tSNARE) and GLAST. This supports the possibility that the molecular structure of the cell membrane directly under the membrane may be a barrier to stability. Biochemical analysis, ultra-morphological analysis related to the paper is now being written.

项目成果

Isoform-specific phosphorylation of Sept5/CDCrel-1 by cyclin-dependent kinase 5 inhibits the interaction

细胞周期蛋白依赖性激酶 5 对 Sept5/CDCrel-1 的异构体特异性磷酸化抑制了相互作用

• 发表时间: 2007
• 期刊: Journal of Biological Chemistry (Epub ahead of print) 15-Jan
• 作者: Taniguchi M;Taoka M;Itakura M;Asada A;Saito T;Kinoshita M
• 通讯作者: Kinoshita M

Sept4, a component of presynaptic scaffold and Lewy bodies, is required for the suppression of α-synuclein neurotoxicity

• DOI: 10.1016/j.neuron.2007.01.019
• 发表时间: 2007-02-15
• 期刊: NEURON
• 影响因子: 16.2
• 作者: Ihara, Masafumi;Yamasaki, Nobuyuki;Kinoshita, Makoto
• 通讯作者: Kinoshita, Makoto

Loss of Sept4 exacerbates liver fibrosis through the dysregulation of hepatic stellate cells

• DOI: 10.1016/j.jhep.2008.05.026
• 发表时间: 2008-11-01
• 期刊: JOURNAL OF HEPATOLOGY
• 影响因子: 25.7
• 作者: Iwaisako, Keiko;Hatano, Etsuro;Kinoshita, Makoto
• 通讯作者: Kinoshita, Makoto

Sept4, a Component of Presynaptic Scaffold and Lewy Bodies, Is Required for the Suppression of alpha-Synuclein Neurotoxicity.

Sept4 是突触前支架和路易体的组成部分，是抑制 α-突触核蛋白神经毒性所必需的。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Neuron 53
• 作者: Ihara M;Yamasaki N;Hagiwara A;Tanigaki A;Kitano A;Hikawa R;Tomimoto H;Noda M.;Takanashi M;Mori H;Hattori N;Miyakawa T;Kinoshita M.
• 通讯作者: Kinoshita M.

蛍光偏光顕微鏡が解いたセプチン線維配向の謎

荧光偏振显微镜解开septin纤维取向之谜

• 发表时间: 2007
• 期刊: 蛋白質核酸酵素 52(1)
• 作者: Furuse;M.;Tsukita;S.;木下 専
• 通讯作者: 木下 専