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ペルオキシソーム膜ABCタンパク質のペルオキシソーム膜選択的局在化機構の解析

过氧化物酶体膜ABC蛋白的过氧化物酶体膜选择性定位机制分析

基本信息

批准号：
18790050
负责人：
柏山恭範
金额：
$ 2.18万
依托单位：
University of Toyama
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

ペルオキシソームは、脂肪酸のβ酸化を含む脂質代謝系など生体にとって必要不可欠な機能を担うオルガネラである。しかしながら、ペルオキシソームの形成機構については不明な点が多く、ペルオキシソーム膜タンパク質の局在化機構についても殆ど解明されていない。そこで本研究では、ペルオキシソーム膜ABCタンパク質の細胞内局在化機構について着目し、ペルオキシソーム膜タンパク質の局在化機構を明らかにすることを目的としている。本年度は1.ペルオキシソーム膜タンパク質の局在化に関与するタンパク質群の機能解析、2.ペルオキシソーム膜ABCタンパク質と考えられているP70Rの細胞内局在及び局在化機構について解析を行い、以下の成果を得た。1.ペルオキシソーム膜上に存在するペルオキシソーム膜形成因子Pex3pを大腸菌により発現・精製し、その機能解析を行った。その結果、Pex3pが同じくペルオキシソーム膜形成因子であるPex19pと相互作用すること、またその相互作用にはPex3pのTrp-109が重要であることを見いだした。研究代表者はPex19pが細胞質中でペルオキシソーム膜タンパク質を可溶化するシャペロン様タンパク質であることを報告しており、本研究によりPex3pが、Pex19pと相互作用して輸送されてくるペルオキシソーム膜タンパク質のペルオキシソーム膜上での受容体として機能している可能性が示唆された。2.P70Rの細胞内局在について、C末端HAタグ融合タンパク質をCHO細胞に発現させ解析を行った。その結果、P70Rがペルオキシソームではなく小胞体に局在することが明らかとなった。P70RはPMP70等のペルオキシソーム膜ABCタンパク質によく保存されたN末端細胞質領域を欠いており、ペルオキシソーム膜タンパク質の細胞内局在がN末端領域に存在する局在化シグナルにより規定されている可能性が示唆された。

The lipid metabolism system contains fatty acids and fatty acids. It is essential for the development of lipid metabolism. In the process of forming the mechanism, the number of unknown points is increased, and the number of unknown points is increased. This study is aimed at clarifying the mechanism of cellular localization of the membrane. This year, the following results were obtained: 1. functional analysis of the selected membrane structure and its related substances; 2. analysis of the selected membrane ABC structure and its related substances in the cellular structure and its related substances of P70R. 1. The membrane forming factor Pex3p exists in the membrane of the selected group, and the function analysis of the selected group is carried out. Pex3p is the same as Pex19p and Pex3p is the same as Pex109. The study representative reported that Pex 19p could be used as a receptor in cytoplasm for protein solubilization, and this study was conducted to demonstrate the possibility of interaction between Pex 3p and Pex 19p. 2. P70R was detected in CHO cells and analyzed by C-terminal HA fusion. P70R is the best choice for small cells. P70R PMP70 and other molecules in the cytoplasm of the membrane ABC, preservation of the N-terminal cytoplasmic domain, the existence of the membrane in the cytoplasm of the N-terminal domain, the possibility of the regulation of the structure in the cytoplasm.