小児固形腫瘍の分子病理診断法の標準化

儿科实体瘤分子病理学诊断方法标准化

• 批准号: 18790264
• 负责人: 松井 淳
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: National Research Institute for Child Health and Development
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790264/
• 关键词: 腫瘍; 病理学; 分子診断; 癌; 臨床

本研究は,小児期に好発する固形腫瘍の分子病理学的診断を標準化することにより,診断の精度向上,迅速化をはかることを目的とした。神経芽腫の予後層別化因子であるMYCN増幅判定におけるホルマリン固定パラフィン切片(FFPE)を用いたChromogenic in situ hybridization(CISH)法の有用性を検討した。神経芽腫細胞より作製したFFPEにてMYCNプローブを用いたCISH法を行い,MYCNシグナルを検出することが可能であった。FISH(fluorescence in situ hybridization)法のほうが感度は良好で,染色体数をカウントできるプローブが存在するなどの利点があり,現時点では,FISH法をまず行うべきと考えられた。一方,CISH法でも組織構築の解析が容易などの利点もあり,腫瘍成分が少ない場合,腫瘍細胞の構成に多様性がある場合は,CISH法を併用したほうが良いと考えられた。また,CISH法における最適な固定時間,固定方法を検討した。その結果,20%中性緩衝ホルマリンで良好な感度が得られること,一晩〜二日間の固定では良好な結果が得られるが,それ以上固定するとシグナルが低下するが,7日間の固定でも薄いシグナルが得られることが判明した。Ewing肉腫細胞を用いて作製したFFPEにてEWSプローブを用いたCISHを行った。CISH法では判定可能であったが,2種類のシグナルが比較的近い色(赤,褐色)であるため,CISH法におけるシグナルの色をより判別しやすくするよう他発色法を検討中である。Ewing肉腫のキメラ遺伝子解析のためのRT-PCR法を行う最適な条件を検討した。MMuLV由来逆転写酵素において最も良好な結果が得られた。5種類ある融合遺伝子に現時点で最適と考えられるプロープを用いたPCR法のプロトコールを作成した。

The aim of this study is to standardize the molecular pathology of solid tumors in childhood, improve the accuracy of diagnosis and speed up the diagnosis. The usefulness of the Chromogenic in situ hybridization(CISH) method using Hollmann Fixed Paraffin Slice (FFPE) to determine the increase in MYCN as a post-stratification factor for meningiomas was discussed. In the case of brain tumors, the FFPE method may be used to detect them. FISH(fluorescence in situ hybridization) method has good sensitivity, chromosome number, current point,FISH method has good sensitivity, chromosome number, chromosome number and chromosome number. On the one hand,CISH method is easy to analyze tissue structure, tumor composition is less, tumor cell composition is more diverse,CISH method is used together. The CISH method is optimized for fixed time and fixed method. 20% neutral buffer, good sensitivity, one night to two days fixed, good results, above fixed, seven days fixed, low sensitivity Ewing muscle cells are used to control FFPE, EWS and CISH. CISH method can be used to determine the possible color (red, brown) of two kinds of color (red, brown),CISH method can be used to determine the color (red, brown) of two kinds of color (brown),CISH method can be used to determine the color (red, brown) of two kinds of color (brown), CISH method can be used to determine the color (red, brown) of two kinds of color (brown). The optimal conditions for RT-PCR analysis of Ewing sarcoma were discussed. MMuLV is derived from the reverse transcription enzyme, and the best results are obtained. 5 kinds of fusion gene present point is the most suitable test, the PCR method is used to make the test.

项目成果

oncostatinMの造血調節作用に関するinvitroでの検討.

制瘤素M造血调节作用的体外研究。

• 发表时间: 2007
• 作者: 田口 智子;宮川 世志幸;堀内 保臣;斎藤 洋平;竹野内 寿美;北村 紀子;松井 淳;佐藤 伴;鈴木 恭子;斎藤 正博 片桐 洋子;大喜多 肇藤本 純一郎;清河 信敬
• 通讯作者: 清河 信敬

Involvement of insulin-like growth factor-I and insulin-like growth factor binding proteins in pro-B-cell development.

• DOI: 10.1016/j.exphem.2006.01.009
• 发表时间: 2006-04
• 期刊: Experimental hematology
• 影响因子: 2.6
• 作者: T. Taguchi;H. Takenouchi;J. Matsui;Wei-ran Tang;M. Itagaki;Y. Shiozawa;Kyoko Suzuki;S. Sakaguchi;Yohko U Ktagiri;Takao Takahashi;H. Okita;J. Fujimoto;N. Kiyokawa

Interleukin-7 contributes to human pro-B-cell development in a mouse stromai cell dependent culture system

Interleukin-7 有助于小鼠基质细胞依赖性培养系统中人类前 B 细胞的发育

• 发表时间: 2007
• 期刊: Exp Hematol 35(9)
• 作者: Taguchi T;Takenouchi H;Shiozawa Y;Matsui J;Kitamura N;Miyagawa Y;Katagiri YU;Takahashi T;Okita H;Fujimoto J;Kiyokawa N
• 通讯作者: Kiyokawa N