TCF/β-catenin転写複合体のプロテオミクス解析による癌病態の解明

通过 TCF/β-catenin 转录复合物的蛋白质组学分析阐明癌症病理学

• 批准号: 18790467
• 负责人: 井戸川 雅史
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790467/
• 关键词: beta-catenin; TCF-4; Ku70; whtシグナル; プロテオミクス; 大腸癌; Wntシグナル

Wntシグナルは種々の癌,とりわけ大腸癌で高頻度に異常を認めるが,その最下流に位置するTCF/β-catenin転写複合体をプロテオミクスの手法を用いて解析し,その複合体に含まれる蛋白質の同定を試みた。その結果,新規の結合タンパク質としてKu70を同定した。そこで,Ku70がTCF/β-cateninの転写活性に影響を与えるかについてレポーターを用いて解析した。RNAiを用いてKu70の発現を抑制したところTCF/β-cateninの転写活性は増強し,逆にKu70を過剰発現させると転写活性は抑制された。また,Ku70の発現を抑制した際のTCF/β-cateninの標的遺伝子の発現を調べたところ,c-mycやcyclinD1などの標的遺伝子の発現増加を認めた。我々はこれまで,PARP-1がTCF/β-cateninの転写活性を増強することを報告している。そこで,PARP-1とKu70のTCF/β-catenin複合体への結合状況を免疫沈降により調べた結果,PARP-1の存在下ではKu70の結合が減少し,逆にPARP-1が存在しない場合にはKu70の結合が増加することが判明した。DNA障害が起こるとPARP-1は活性化され自己polyADPリボシル化される。そこで大腸癌細胞に対しアルキル化剤でDNA障害を与えたところ,TCF/β-catenin複合体に対するPARP-1の結合量は減少し,逆にKu70は増加していた。その際にTCF/β-cateninの転写活性の減少が認められた。以上から,DNA障害の際にTCF/β-catenin複合体に対するKu70とPARP-1の結合が拮抗的に変化することで,その転写活性が制御されると考えられた。

There are several kinds of cancers in Wnt, the high degree of cancer is very common, the lowest position of TCF/ β-catenin is to write the complex, and the method of cloning is used to analyze it, and the protein in the complex is the same as the test. The results show that the new rules and regulations are the same as those of the new regulations. The results show that the new rules are the same as those of the Ku70. Ku70, TCF/ β-catenin, write the active image and analyze the image using the parsing tool. RNAi has shown that the writing activity of TCF/ β-catenin is stronger than that of TCF/ β-catenin, while the reverse Ku70 is effective. The child of the TCF/ β-catenin filter can be suppressed, and the child of the c-myc cyclinD1 will be increased. I am sorry to inform you that PARP-1 TCF/ β-catenin will improve the performance of the report. In the presence of PARP-1, PARP-1, Ku70, TCF/ β-catenin, immuno-sedimentation, Ku70, and reverse PARP-1, the results of immuno-sedimentation assay showed that the results of immuno-sedimentation assay showed that there was a decrease in the combination of DNA and DNA in the presence of DNA, and there was a combination of DNA and DNA in the presence of DNA. DNA interferes with the activation of PARPs-1, the activation of polyADP, the activation of PARPs and the activation of PARPs. The combination of DNA barrier and TCF/ β-catenin complex was less than that of Ku70, and the combination of DNA damage and DNA damage was not enough. Please tell me that TCF/ β-catenin is very active. In the above tests, DNA-resistant TCF/ β-catenin complex gene Ku70-PARP-1 was combined with antagonistic antitumor drugs, and the activity was tested in the preparation of antitumor drugs.

项目成果

Involvemet of splicing factor-1 in β-catenin/T-cell factor-4-mediated genetransactivation and pre-mRNA splicing

剪接因子 1 参与 β-连环蛋白/T 细胞因子 4 介导的基因反式激活和前 mRNA 剪接

• 发表时间: 2007
• 期刊: Gastroenterology 132
• 作者: Shitashige M;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Frequent epigenetic inzctivation of DICKKOPF family genes in human gastroin gastrointestinal tumors

人类胃肠道肿瘤中 DICKKOPF 家族基因的频繁表观遗传激活

• 发表时间: 2007
• 期刊: Carcinogenesis 28
• 作者: Sato H;et. al.
• 通讯作者: et. al.