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頭頸部悪性腫瘍患者血漿FreeDNAにおけるLOH解析

头颈部恶性肿瘤患者血浆FreeDNA的LOH分析

基本信息

批准号：
18790926
负责人：
高木亮
金额：
$ 2.24万
依托单位：
National Institute of Radiological Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

頭頸部悪性腫瘍は、扁平上皮癌が多く見られるが、その他、腺様嚢胞癌、腺癌、悪性黒色腫など様々な組織型を認め、また、周囲に重要臓器が存在するため、進展例では治療が困難となる場合が多い。循環血液中には、細胞から遊離した状態のDNA(free DNA)が存在することが知られている。また、種々の腫瘍におけるヘテロ結合性の消失(以下LOH)に関する研究から、組織型別LOHのマイクロサテライト領域が判明している。この腫瘍細胞のLOHの局在情報を癌細胞の指紋と考え、循環血清中の腫瘍free DNAの検出を行った。2002年〜2006年までに当院を受診し、組織学的に悪性黒色腫・腺様嚢胞癌と診断された患者のうち、患者および家族に十分なインフォームドコンセントを行った上、同意の得られた16症例の血液サンプルを使用した。Dr.GenTLE(TaKaRa)を使用し、白血球から正常DNAを、QIAamp blood kit(QIAGEN)を使用し、血漿からfree DNAを抽出、PicoGreen(Molecular Probes)を用いて定量を行った。マイクロサテライト解析はジェネティックアナライザ3100(Applied Biosystems)を使用した。16症例中12症例において少なくとも1か所以上の遺伝子座位にLOHが認められた。4個のマイクロサテライトマーカーLOHが有意に認められ、それぞれDIS243、D6S311、D9S161、D19S246であった。本研究では、頭頸部粘膜悪性黒色腫および腺様嚢胞癌患者の血漿を試料とし、ジェネティックアナライザ3100を用いて癌に由来するDNAであることを検証し、特異的なマイクロサテライト領域の特定に成功した。循環腫瘍freeDNAを用いたLOH解析は、今後、癌のスクリーニング検査の有力な方法になり得る可能性があることを明らかにした。

Head and neck squamous cell carcinoma, squamous cell carcinoma, adenocarcinoma, and melanoma are frequently seen. Histological types, pathologies, and important organs are often difficult to treat. DNA(free DNA) in circulating blood cells is known to exist. The study on LOH and tissue type of LOH has been carried out to identify the field of LOH. The LOH of tumor cells is detected by DNA fingerprinting and tumor free DNA detection in circulating serum. From 2002 to 2006, 16 cases of hematological diagnosis and histologic diagnosis of melanoma and glandular carcinoma were performed and approved. Dr. GenTLE(TaKaRa) is used, white blood cells are removed from normal DNA, QIAamp blood kit(QIAGEN) is used, plasma is removed from free DNA, PicoGreen(Molecular Probes) is used to quantify DNA. 3100(Applied Biosystems) 12 out of 16 cases were diagnosed as LOH. 4. DIS243, D6S311, D9S161, D19S246. This study aims to identify and identify specific areas of success in detecting DNA from plasma samples from patients with head and neck mucosal melanoma and adenocarcinoma using DNA from 3100 samples. Cyclical free DNA analysis is a powerful way to detect cancer in the future.