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ヒト虹彩および前房水より誘導された眼特異的抑制細胞の機能解析

人虹膜和前房水来源的眼特异性抑制细胞的功能分析

基本信息

批准号：
18791263
负责人：
杉田直
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

インフォームドコンセントで同意の得られた健常人、白内障、緑内障、ぶどう膜炎患者の末梢血から、CD4^+またはCD8^+T細胞を分離した。また、同意の得られた炎症の既往のない老人性白内障患者から前房水を手術時に0.1mlほど採取し、同様に同意の得られた炎症の既往のない緑内障患者から繊維柱帯切除術で虹彩切除を行う時に切除された虹彩のみ採取した。human IPE(ヒト虹彩色素上皮細胞)は、虹彩組織を酵素処理し、約4-8週間特殊な培地で培養する事で樹立に成功した。上皮細胞かの確認のために、抗サイトケラチン抗体で染色したところ95%が陽性を示した。このhuman IPEはin vitroにおいて強い抑制能を示していた。このhuman IPEはT細胞の細胞増殖抑制や活性化T細胞の産生するIFNγサイトカイン抑制などの強い抑制能力を有していた。また、活動性ぶどう膜炎患者から樹立した眼局所由来T細胞クローンも有意に抑制していた。human IPEはin vitroにおいて抑制T細胞を誘導していた。別の抑制T細胞として、マウス眼色素上皮細胞由来の抑制T細胞を樹立した。C57BL/6マウスの脾臓からT細胞を採取し、マウス色素上皮細胞と共生培養し、X線をかけて抑制T細胞として使用した。このT細胞は別の活性化T細胞を有意に抑制し、Foxp3などの抑制T細胞マーカーを発現していた。このマウス抑制T細胞は実験的自己免疫ぶどう膜炎(眼内炎症)を抑制していた。以上の結果より、眼内レジデント細胞(眼色素上皮細胞など)やその眼特異的抑制T細胞は難治性の眼内炎症性疾患に臨床応用出来る可能性を示した。

The results showed that CD4^+ and CD8^+T cells were isolated from the peripheral blood of healthy people, cataract patients, cataract patients and patients with acute pancreatitis. In addition, consent was obtained from patients with senile cataract who had previous inflammation. Before surgery, 0.1ml of aqueous humor was taken. In the same way, consent was obtained from patients with senile cataract who had previous inflammation. Before surgery, iridectomy was taken. Human IPE(iridescent pigment epithelial cells) were successfully cultured in a special culture medium for about 4-8 weeks after enzyme treatment of iridescent tissues. Epithelial cells were identified and 95% of the antibodies were positive. This human IPE is in vitro and can be inhibited. This human IPE has the ability to inhibit the proliferation of T cells and the production of activated T cells. In patients with acute pancreatitis, T cells are intentionally suppressed due to the development of ocular disease. Human IPE is in vitro inhibiting T cell induction. Suppressor T cells are derived from pigment epithelial cells. C57BL/6 cells are used in symbiotic culture of pigment epithelial cells. These T cells are intentionally inhibited by activated T cells, and Foxp3 is activated by inhibited T cells. This process inhibits T cells from developing their own immune system and inhibits inflammation of the eye. These results indicate the potential clinical utility of ocular pigment epithelial cells and eye-specific suppressor T cells in refractory intraocular inflammatory diseases.