造血ニッチが維持する破骨細胞前駆細胞の性質

造血生态位维持的破骨细胞前体细胞的特性

• 批准号: 18791376
• 负责人: 溝口 利英
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Matsumoto Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791376/
• 关键词: M-CSF; RANKL; Ki67; 細胞周期; p38MAPK; NFATc1; pOCP; ニッチ; ブロモデオキシウリジン; Ca欠乏食

以前、造血を支持する骨芽細胞が破骨細胞前駆細胞も支持するという仮説をたてた。In vitroにおける破骨細胞分化では、細胞周期の停止したpOCP(post-mitotic osteoclast precursors、増殖後破骨細胞前駆細胞)を介して分化することを明らかにした。平成19年度は、pOCPから破骨細胞への分化機構を解析することを目的とし、本研究を計画した。実験計画は、以下のテーマを明らかにすることを目標とし、遂行した。(計画 1)前駆細胞から破骨細胞分化期間の解析:E-GFPを発現するマウスを用いて実験を試みたが、蛍光強度の減弱などにより、解析が困難であった。現在、全身性にβガラクトシダーゼを発現する ROSA26マウスを用いて実験系の構築中である。(計画 2)QuOPの局在の解析:QuOPマーカーは、RANK^+、c-Fms^+、Ki6767^-(増殖マーカー)、TRAP^-である。そこで、破骨細胞が存在しないRANKL欠損マウスを用いてQuOPの局在解析を試みた。(1)RANKL欠損マウスの脛骨は、骨量の上昇を呈し、TRAP陽性細胞は認められない。(2)RANKL欠損マウスにおいて、骨組織に沿った場所にのみRANK、c-Fmsダブル陽性細胞(QuOPs)が認められた。さらに、それらのほとんどはKi67陰性であった。活性型ビタミンD_3の投与、卵巣切除、骨折治癒過程におけるpOCPの局在および量的変化については、現在解析中である。(計画 3)pOCPへの分化に必須なシグナル伝達経路の解析:RANKのプロモーター制御下にCre組み換え酵素を発現するマウスは現在作製中である。作製後破骨細胞分化に必要と考えられてきたシグナル伝達分子(p38MAPキナーゼ、NFATc1など)をloxP siteで挟んだマウスを構築し、生体内の造血ニッチにおけるpOCPへの分化に必須なシグナル伝達経路を明らかにしていく。

Bone bud cells, osteoclast cells, and hematopoietic cells support the development of bone marrow cells. In vitro, osteoclast differentiation is mediated by cell cycle arrest pOCP(post-mitotic osteoclast precursors). This study is planned for the purpose of analyzing the differentiation mechanism of osteoclast cells in Heisei 19. The following is a list of activities (Project 1) Analysis of osteoclast differentiation period:E-GFP expression, fluorescence intensity and analysis were difficult. Now, ROSA26 is in the process of being used in the construction of the whole system. (Project 2)QuOP analysis:QuOP ^-, RANK^+, c-Fms^+, Ki6767^-(), TRAP^- The osteoclasts exist and the osteoclasts are not damaged. (1)RANKL deficiency, bone mass increase and TRAP positive cells were detected. (2)RANKL deficiency, bone tissue damage, and c-Fms positive cells (QuOPs) were identified along the site.さらに、それらのほとんどはKi67阴性であった。Active type D_3 is in the process of injection, ovulectomy and fracture healing. The pOCP is in the process of transformation and analysis. (Plan 3) Analysis of the essential pathway for the differentiation of pOCP: Under the control of RANK's promo-ta-, Cre-group enzymes are discovered. This is currently in production. After treatment, osteoclast differentiation is necessary for the construction of loxP sites containing molecules (p38MAP, NFATc1). Hematopoiesis in vivo is necessary for differentiation of osteoclasts.

项目成果

In vivoにおいて細胞周期の停止した破骨細胞前駆細胞(pOCP)は5-FU悲感受性である

在体内，细胞周期停滞的破骨细胞前体细胞 (pOCP) 对 5-FU 敏感。

• 发表时间: 2007
• 作者: Nakamichi Y;Udagawa N;Yasuda H;Nakamura M;Kobayashi Y;Takahashi N Nakamichi Y;Udagawa N;Yasuda H;Nakamura M;Kobayashi Y;Takahashi N;中道裕子,宇田川信之,林眞一,保田尚孝,中村美どり,小林泰浩,高橋直之;溝口利英,武藤昭紀,細矢明宏,中道裕子,山下照仁,小林泰浩,宇田川信之,伊藤充雄,高橋直之
• 通讯作者: 溝口利英,武藤昭紀,細矢明宏,中道裕子,山下照仁,小林泰浩,宇田川信之,伊藤充雄,高橋直之

In vitro bioactivity and gene expression by cells cultured on titanium dioxide doped phosphate-based glasses

• DOI: 10.1016/j.biomaterials.2007.03.018
• 发表时间: 2007-07-01
• 期刊: BIOMATERIALS
• 影响因子: 14
• 作者: Abou Neel, Ensanya Ali;Mizoguchi, Toshihide;Knowles, Jonathan Campbell
• 通讯作者: Knowles, Jonathan Campbell

Secretion of L-glutamate from osteoclasts through transcytosis

• DOI: 10.1038/sj.emboj.7601317
• 发表时间: 2006-09-20
• 期刊: EMBO JOURNAL
• 影响因子: 11.4
• 作者: Morimoto, Riyo;Uehara, Shunsuke;Moriyama, Yoshinori
• 通讯作者: Moriyama, Yoshinori

Coordination of microtubules and the actin cytoskeleton is important in osteoclast function, but calcitonin disrupts sealing zones without affecting microtubule networks

• DOI: 10.1016/j.bone.2006.04.010
• 发表时间: 2006-10-01
• 期刊: BONE
• 影响因子: 4.1
• 作者: Okumura, S.;Mizoguchi, T.;Takahashi, N.
• 通讯作者: Takahashi, N.

骨芽細胞/ストローマ細胞が支持する破骨細胞ニッチ

由成骨细胞/基质细胞支持的破骨细胞生态位

• 发表时间: 2008
• 期刊: 腎と骨代謝 21
• 作者: 岩松-小林 洋子;西原 大輔;平田 政嗣;他;溝口 利英
• 通讯作者: 溝口 利英