Analysis of osteoclast progenitors using a novel high-sensitivity detection method for RANK-expressing cells

使用新型 RANK 表达细胞高灵敏度检测方法分析破骨细胞祖细胞

• 批准号: 21K19615
• 负责人: 溝口 利英
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19615/
• 关键词: 破骨細胞; 破骨細胞前駆細胞; GST-RANKL; FACS; RANK

破骨細胞は骨の維持に必須な骨吸収細胞であるが、前駆細胞の動態については良くわかっていない。この理由として、破骨細胞分化がコミットした前駆細胞 (Committed破骨前駆細胞) が同定されておらず、その性状が未解明であることが挙げられる。その解析を困難にするその要因はCommitted破骨前駆細胞を同定するツールが乏しいためであった。破骨細胞前駆細胞は、RANKLの受容体であるRANKを発現する。我々は、ビオチン化したGST-RANKLを用いることにより、破骨細胞前駆細胞を含むRANK陽性画分を高感度で検出・回収する方法を考案した。今年度は、GST-RANKL、抗B220抗体、抗CSF-1R抗体により得られた２つの画分(B220－/RANK－/CSF-1R+とB220－/RANK+CSF-1R+画分)の破骨細胞分化能をin vitro培養系により解析した。セルソーターで回収した各細胞画分に、CSF-1およびRANKLを添加し、培養1、2、3日後にTRAP陽性単核破骨細胞数を計測した。その結果、培養3日目において、B220－/RANK－/CSF-1R+画分は、B220－/RANK+CSF-1R+画分よりも有意に多いTRAP陽性単核破骨細胞数が認められた。以上より、B220－/RANK－/CSF-1R+画分は、より多くの単核破骨細胞を作り出す起源となる細胞が含まれることが示唆された。一方、破骨細胞前駆細胞は、細胞周期の停止を介して成熟破骨細胞に分化する。したがって、より少ない単核破骨細胞が認められたB220－/RANK+CSF-1R+画分は、細胞周期が停止した破骨細胞分化にコミットした前駆細胞が含まれる可能性が示唆された。

The maintenance of broken bone cells must be based on the absorption of bone cells and the dynamics of previous cells. The reason for the disease, the differentiation of the cell of the osteoclast, the cell differentiation of the osteoclast, the pre-cell of the Committed (the preosteoclast cell of the Osteoclast), and the character of the osteoclast have not been explained. The reason for the difficulty is that the cell before the fracture of Committed is the same as that before the bone is broken. The precellular tissue of the osteoclast and the receptive body of the RANKL were found to be damaged by RANK. I would like to use the word "GST-RANKL" to mark "high sensitivity" with the words "RANK", "precellular", "precellular", "high sensitivity" and "examination". This year, GST-RANKL, anti-B220 antibody and anti-CSF-1R antibody got a score of 2%. (B220, in vitro, anti-CSF220, anti-CSF1R, anti-CSF220, anti-CSF1R, anti-CSF1R, After 1, 2 and 3 days of incubation, the number of cells in each cell was calculated, and the number of cells was calculated after 1, 2 and 3 days of culture. The cells were divided into four groups: CSF-1, RANKL, and after 1, 2 and 3 days. The result of the experiment, the result of 3-day training, the score of B220mura

项目成果

Gli1陽性歯髄細胞の象牙質再生過程における機能解析

Gli1阳性牙髓细胞在牙本质再生过程中的功能分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 高濱暁;関有里;佐藤幸平;建部廣明;溝口利英;八若保孝;細矢明宏
• 通讯作者: 細矢明宏

マウス歯髄・歯根膜におけるType H毛細血管の経時的変化

小鼠牙髓和牙周膜H型毛细血管的时间变化

• 发表时间: 2021
• 作者: 三友啓介;駒田朋昭;五十嵐 章智;村松 敬
• 通讯作者: 村松 敬

骨髄の間葉系細胞が制御する硬組織調節メカニズム

由骨髓间充质细胞控制的硬组织调节机制

• 发表时间: 2021
• 作者: 溝口利英

Mesenchymal cell TRPM7 expression is required for bone formation via the regulation of chondrogenesis.

间充质细胞 TRPM7 表达是通过调节软骨形成来形成骨所必需的。

• DOI: 10.1016/j.bone.2022.116579
• 发表时间: 2023
• 期刊: Bone
• 影响因子: 4.1
• 作者: Shin M;Mori S;Mizoguchi T;Arai A;Kajiya H;Okamoto F;Bartlett JD;Matsushita M;Udagawa N;Okabe K
• 通讯作者: Okabe K

抜歯窩と大腿骨骨欠損の骨治癒過程における病理学的差異

拔牙槽与股骨骨缺损骨愈合过程的病理差异

• 发表时间: 2022
• 作者: 伊藤慎一郎;笠原典夫;北村啓;松永智;溝口利英;笠原正貴;山口朗
• 通讯作者: 山口朗