菌糸体キトサンとゼラチンからなる皮膚細胞再生用生分解性二層スカッフオールド

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キチンの脱アセチル化物であるキトサンはキチンと同様に生分解性、生体適合性に富む上に抗菌活性も示す。菌糸体由来のキトサンは繊維芽細胞接着性を示し、生体由来高分子の一つであるゼラチンも生分解性、生体適合性の高い物質の一つであり、皮膚細胞の増殖に効果的であることが知られている。そこで、菌糸体由来のキトサンを各種菌糸体から抽出し、それをゼラチンやコラーゲンとハイブリットさせてスカッフォールドを作製し、表皮細胞および真皮細胞への培養性をチェックし、人工皮膚の創製を大きな目標としている。特に、皮膚の表皮側と真皮側の細胞増殖に適した素材を用いた二層構造スカッフォールドのデザインはこれまでにない試みであり、さらに、今回用いる素材はいずれも生分解性に優れていることから、生体毒性を示さず治癒後は分解・消滅することが期待される。そこで、菌糸体キトサンの生合成として、菌類(Gongronella butleri ATCC 42618とAbsidia coerulea ATCC 14076)をグルコースベースの培地中で培養し菌糸体を得た。これはキトサン-グルカン複合体であるので、アルカリ処理や酵素処理を併用して、菌糸体由来キトサンの抽出・単離を行い良好な収率で菌糸体キトサンを得た。次いで、平成19年度に検討したキトサン及びゼラチンからスカッフォールドを調製する方法をベースに、二層構造スカッフォールドの調製方法を検討した。得られたスカッフォールドの生分解性、機械的強度、膨潤率などの諸性質を検討するとともに、表皮細胞および真皮細胞の二種類の細胞について細胞増殖性を検討し、人工皮膚としての適用性を検討した結果、菌糸体由来キトサンから調製したスカッフォールドが最も優れた細胞接着性を示すことが判明した。