新育種法のためのアポミクシス遺伝子座解析とその導入方法の開発

新育种方法的无融合生殖基因座分析及其引种方法的开发

• 批准号: 07J00950
• 负责人: 和田 直樹
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J00950/
• 关键词: 植物形質転換; バイオアクティブビーズ法; 巨大DNA; バイオティブビーズ法; 人工染色体

これまでの研究を通して、アポミクシス遺伝子座を含む巨大DNA断片を導入する方法として期待されたバイオアクティブビーズ法に関して、いくつかの改良すべき点が浮かび上がってきた。そのため、まずバイオアクティブビーズ法を用いて関与するゲノム領域をそのままイネに導入するという本研究のアプローチが有効であるかを検証する必要があった。今年度は、形質転換イネにおいて、期待された表現型が観察されるかどうかをまず調べた。この形質転換体には、タルホコムギ種子の硬軟質性に関与するゲノム領域がそのまま導入されている。この形質転換イネ由来の胚乳を電子顕微鏡で観察し、さらにその米粉の特性を物理化学的手法を用いて解析した。その結果、形質転換されたコメにおいては、胚乳が間隙の多い構造をとっていることが観察され、また物理化学特性については、米粉の粒子サイズが小さくなっていることが分かった。これらの結果は、硬軟質性に関与するゲノム領域を巨大なDNAとして導入し、期待する形質を付与するという研究アプローチが有効なものであるという事を示している。また、バイオアクティブビーズ法で導入できるDNAサイズを検討するため、二つ以上のBAC DNA(約100kb)の共導入実験を行った。その結果、二つのBAC DNAの共導入に成功した。それぞれのBAC DNA由来の遺伝子の存在をPCR、サザンハイブリダイゼーションによって確認した。これらの結果は、バイオアクティブビーズ法がアポミクシス関連ゲノム領域を含む巨大DNA導入に対して有効である可能性を示唆している。しかしながら、導入されたDNA断片の再編成など昨年度得られた結果とあわせて考えると、未だ改良が必要な段階であるといえる。

This study is aimed at improving the efficiency of DNA sequencing and introducing large DNA fragments into the genome. This study was conducted to examine and verify the application of this method. This year, the quality of the product is expected to change, and the phenotype is expected to change. The hard and soft properties of the seed are related to the quality of the seed. The endosperm from which these morphological changes occur has been observed by electron microscopy, and the characteristics of rice flour have been analyzed by physicochemical methods. As a result, the physical and chemical properties of rice flour are changed, and the structure of endosperm is changed. The results are hard and soft, and the field is large and the DNA is expected to be applied. The co-introduction of more than two BAC DNA(about 100kb) was carried out. As a result, the co-introduction of BAC DNA was successful. The presence of BAC DNA fragments was confirmed by PCR and DNA sequencing. The results of this study are as follows: 1. The method of DNA transformation is to establish the relationship between DNA transformation and DNA transformation. The DNA fragment was reorganized into two parts: the first part of the DNA fragment and the second part of the DNA fragment.

项目成果

The effects of puroindoline b on the ultrastructure of endosperm cells and physicochemical properties of transgenic rice plant

• DOI: 10.1016/j.jcs.2009.11.010
• 发表时间: 2010-03
• 期刊: Journal of Cereal Science
• 影响因子: 3.8
• 作者: Naoki Wada;S. Kajiyama;J. Cartagena;Linyen Lin;Y. Akiyama;M. Otani;G. Suzuki;Y. Mukai;N. Aoki-N.-Aok

Development of a New Plant Transformation System with Large DNAs using Bioactive Beads Method

使用生物活性珠方法开发具有大 DNA 的新型植物转化系统

• 发表时间: 2008
• 作者: Naoki WADA;Shin' ichiro KAJIYAMA;Yukio AKIYAMA;Shigeki KAWAKAMI;Motoyasu OTANI;Takiko SHIMADA;Naoko NOSE;Go SUZUKI;Yasuhiko MUKAI and Kiichi FUKUI
• 通讯作者: Yasuhiko MUKAI and Kiichi FUKUI

Bioactive Beads-Mediated Transformation Of Rice With Large DNA Fragments Containing Aegilops tauschii Hardness Genes

生物活性珠介导的含有节节麦硬度基因大DNA片段的水稻转化

• 发表时间: 2010
• 作者: 中野 道治;ら;稲葉謙介;稲葉謙介;和田直樹;和田直樹
• 通讯作者: 和田直樹

バイオアクティブビーズ法によるハードネス遺伝子群導入イネの作出

利用生物活性珠法培育具有硬度基因的水稻

• 发表时间: 2008
• 作者: 中野 道治;ら;稲葉謙介;稲葉謙介;和田直樹;和田直樹;和田直樹
• 通讯作者: 和田直樹

バイオアクティブビーズ法によるコムギ有用遺伝子群を含む巨大DNAのイネへの導入

使用生物活性珠方法将含有有用小麦基因的巨型 DNA 引入水稻

• 发表时间: 2007
• 作者: 和田直樹;池内智彦;梶山慎一郎;大谷基泰;鈴木剛;向井康比己;島田多喜子;福井希一
• 通讯作者: 福井希一