权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ユビキチンプロテアソームシステムにおける新たな基質選択性についての解析

泛素蛋白酶体系统新底物选择性分析

基本信息

批准号：
07J01236
负责人：
南亮介
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、Rpn10c-Scythe/BAG6依存的分解機構の生体内における機能を解析し、ユビキチン-プロテアソームシステム(以下UPS)における新たな基質選択性、即ちプロテアソーム自体、またリクルート分子の基質選別性を明らかにすることである。これまでにRpn10cは発生段階特異的に発現していることを見出していたが、生理的な機能は不明であった。そこでまず、Rpn10c結合タンパク質として同定したScythe/BAG6の機能を解析することによりRpn10cの存在意義、UPSの基質選択性に迫ることとした。まず哺乳類培養細胞を用いてScythe/BAG6のUPSにおける分子メカニズムの解析を行った結果、Scythe/BAG6がユビキチン化タンパク質をプロテアソームヘ運ぶリクルート分子であることが示唆された。次にScythe/BAG6がリクルートするUPSの基質を、各種データベース、MALDI TOF/TOF MSを用いたPMF等を駆使して探索したところ、その候補の一つがnascent polypeptides(翻訳段階で生成する不完全なポリペプチド)であることを明らかにした。またin vitro翻訳系を用いてより詳細な解析を行った結果、Scythe/BAG6の機能阻害により、nascent polypeptidesのユビキチン化が阻害されることを見出した。さらに、nascent polypeptidesはMHC class Iに提示されるペプチドの供給源であることが明らかになっており、Scythe/BAG6ノックダウンにより細胞表面に発現するMHC class I量が減少した。これらの結果よりScythe/BAG6は、nascent polypeptidesをプロテアソームヘリクルートし、その分解とMHC class Iによる抗原提示に関与することが示唆される。またScythe/BAG6は「リクルート」という機能において、従来のリクルート分子のように「ユビキチン化した基質」をプロテアソームヘ運ぶのではなく、「ユビキチン化を促す」プラットフォーム様の役割を果たしつつ基質をプロテアソームヘ運ぶことが示唆される。現在これらScythe/BAG6の機能にRpn10cが関与するかどうか解析を行っている。

The purpose of this study is to analyze the function of Rpn 10c-Scythe/BAG6-dependent decomposition mechanism in vivo, and to clarify the new matrix selectivity of Rpn 10c-Scythe/BAG 6-dependent decomposition mechanism (UPS). Rpn 10c is the first to develop a segment-specific, physiological function. Rpn 10c combines the properties of the UPS with the properties of Scythe/BAG6. The results of molecular analysis of UPS of Scythe/BAG6 in cultured mammalian cells show that UPS of Scythe/BAG6 can be used to analyze the molecular structure of UPS. Scythe/BAG6 is a new type of UPS matrix, a variety of data sets, MALDI TOF/TOF MS, PMF, etc., which are used to explore new technologies and candidates. The results of detailed analysis of the in vitro translation system, the functional resistance of Scythe/BAG6, and the resistance of natural polypeptides are presented. The amount of MHC class I present on the surface of cells is reduced when the MHC class I content is detected by the source of MHC class I. Scythe/BAG6 is a new type of polypeptide that can be used to analyze MHC class I antigens. Scythe/BAG6 is a functional group, a group of sub-groups, a group of sub-groups and a group of sub-groups. Now Scythe/BAG6 functions Rpn 10c and Rpn 10c.