魚類のダイオキシン動態及び毒性におけるチトクロームP450の新たな役割

细胞色素 P450 在鱼类二恶英动态和毒性中的新作用

• 批准号: 07J04313
• 负责人: 久保田 彰
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Rakuno Gakuen University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J04313/
• 关键词: ゼブラフィッシュ; ダイオキシン; 発生毒性; P450; CYP1C; AhR; シクロオキシゲナーゼ

本研究の目的は、ダイオキシン(TCDD)の汚染マーカーとしての重要性を広く認められながらその存在意義さえ不明であったチトクロームP450(CYP)分子種のダイオキシン毒性における新たな役割を明らかにすることである。我々はこれまで、TCDDやβ-naphthoflavone(BNF)によるAh受容体(AhR)の活性化がゼブラフィッシュ胚において中脳血流遅延を引き起こすことを見いだし、有用な発生毒性モデルであることを報告してきた。昨年度までに、モルフォリノアンチセンス法によるAhR2およびCYP1C2ノックダウン処置で、TCDDおよびBNF誘発性の中脳血流遅延は有意に回復することを明らかにした。本年度はまず、CYP1C1ノックダウンによっても、CYP1C2と同様に血流遅延は回復することを明らかにした。また、頭部切片を用いてin situ hybddizationを実施したところ、TCDD処置によりCYP1C1/1C2両分子種が中脳静脈で誘導されることを確認した。以上の成績は、TCDDやBNFによる中脳血流遅延にAhR2を介して誘導されたCYP1C1/1C2が関与することを示唆している。一方、TCDD暴露によって中脳静脈および前脳動脈の走行に異常が認められた。走行異常はTCDD濃度依存性に増加し、分岐、弧の縮小、血管新生などに分類された。TCDDによる両血管の走行異常は、AhR2もしくはAhR nuclear translocator 1(Arnt1)のノックダウンにより回復した。またBNF処置によりTCDDと類似した血管走行異常が観察され、この異常もAhR2およびArnt1ノックダウンによって回復した。TCDD処置による両血管の血流遅延は抗酸化物質によって回復したが、血管の走行異常に変化はみられなかった。以上の成績は、AhRの活性化が血管形成にも影響しうることを示唆する。

这项研究的目的是阐明细胞色素P450（CYP）分子物种中二恶英毒性中的新作用，该物种已被广泛认为是污染标记，但其存在甚至还不知道。我们先前已经报道说，TCDD和β-萘叶酮（BNF）激活AH受体（AHR）会导致斑马鱼胚胎中脑中血流延迟，并且是一种有用的发育毒性模型。截至去年，我们发现TCDD和BNF诱导的中脑血流通过Morpholino反义治疗可显着改善。今年，我们首先透露，CYP1C1敲低也可以恢复血流延迟，就像CYP1C2一样。此外，使用头部切片进行原位杂化，并证实TCDD处理在中脑静脉中诱导了两种CYP1C1/1C2分子物种。这些结果表明，通过AHR2诱导的CYP1C1/1C2参与了由于TCDD和BNF引起的脑脑中血流的延迟。另一方面，TCDD暴露在中脑静脉和前脑动脉中显示出异常。运行异常以TCDD浓度依赖性方式增加，并分类为分叉，弧降低和血管生成。由TCDD引起的两种血管的异常是通过敲低AHR2或AHR核转运剂1（ARNT1）解决的。此外，通过BNF治疗观察到了与TCDD相似的血管血管异常，并且通过AHR2和ARNT1敲低也可以解决这种异常。由于TCDD处理，抗氧化剂恢复了两种血管中的延迟血流，但在血管中的异常情况下未观察到任何变化。以上结果表明AHR的激活也会影响血管生成。

项目成果

AHR2-ARNT1 signaling-dependent disorder of blood vessel formation in the brain of developing zebrafish exposed to TCDD

暴露于 TCDD 的发育斑马鱼大脑中 AHR2-ARNT1 信号依赖性血管形成障碍

• 发表时间: 2009
• 作者: M.Nakada;A.Higo;H.Fujita;H.Toshiyoshi;K.Takahashi;厚香苗;Muneki Nakada;厚 香苗;厚 香苗;Kazuhiro Takahashi;中田宗樹;Muneki Nakada;Muneki Nakada;Muneki Nakada;中田 宗樹;Ho Nam Kwon;Yi Yuheor;久保田彰;寺岡宏樹;久保田彰
• 通讯作者: 久保田彰

Role of cyclooxygenase 2-thromboxane pathway in 2, 3, 7, 8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin-induced decrease in mesencephalic vein blood flow in the zebrafish embryo

环氧合酶2-血栓烷途径在2,3,7,8-四氯二苯并-对-二恶英诱导的斑马鱼胚胎中脑静脉血流减少中的作用

• 发表时间: 2009
• 期刊: Toxicology and Applied Pharmacology 234
• 作者: M.Nakada;A.Higo;H.Fujita;H.Toshiyoshi;K.Takahashi;厚香苗;Muneki Nakada;厚 香苗;厚 香苗;Kazuhiro Takahashi;中田宗樹;Muneki Nakada;Muneki Nakada;Muneki Nakada;中田 宗樹;Ho Nam Kwon;Yi Yuheor;久保田彰;寺岡宏樹
• 通讯作者: 寺岡宏樹

TCDD誘発性循環障害におけるシクロオキシゲナーゼートロンボキサン経路の役割

环氧合酶-血栓烷通路在 TCDD 诱导的循环功能障碍中的作用

• 发表时间: 2008
• 作者: M.Nakada;A.Higo;H.Fujita;H.Toshiyoshi;K.Takahashi;厚香苗;Muneki Nakada;厚 香苗;厚 香苗;Kazuhiro Takahashi;中田宗樹;Muneki Nakada;Muneki Nakada;Muneki Nakada;中田 宗樹;Ho Nam Kwon;Yi Yuheor;久保田彰;寺岡宏樹;久保田彰;久保田彰;久保田彰;久保田彰;久保田彰;久保田彰;小川輝;久保田彰
• 通讯作者: 久保田彰

Role of cytochrome P450 1C genes in the reduced mesencephalic vein blood flow caused by activation of aryl hydrocarbon receptor 2 in the zebrafish embryo

细胞色素P450 1C基因在斑马鱼胚胎芳烃受体2激活引起的中脑静脉血流减少中的作用

• 发表时间: 2009
• 作者: M.Nakada;A.Higo;H.Fujita;H.Toshiyoshi;K.Takahashi;厚香苗;Muneki Nakada;厚 香苗;厚 香苗;Kazuhiro Takahashi;中田宗樹;Muneki Nakada;Muneki Nakada;Muneki Nakada;中田 宗樹;Ho Nam Kwon;Yi Yuheor;久保田彰;寺岡宏樹;久保田彰;久保田彰
• 通讯作者: 久保田彰

発達中ゼブラフィッシュにおけるAh受容体活性化による脳血管走行の異常

发育中的斑马鱼由于Ah受体激活导致脑血管移动异常

• 发表时间: 2008
• 作者: M.Nakada;A.Higo;H.Fujita;H.Toshiyoshi;K.Takahashi;厚香苗;Muneki Nakada;厚 香苗;厚 香苗;Kazuhiro Takahashi;中田宗樹;Muneki Nakada;Muneki Nakada;Muneki Nakada;中田 宗樹;Ho Nam Kwon;Yi Yuheor;久保田彰;寺岡宏樹;久保田彰;久保田彰;久保田彰;久保田彰;久保田彰;久保田彰;小川輝
• 通讯作者: 小川輝