消化管吸収に関わる薬物輸送担体と機能調節因子の解明および生体膜透渦評価系への応用

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消化管吸収に関わる薬物輸送担体と機能・発現調節因子の解明を目的として、in vitro系においトランスポーター機能・発現調節因子であることが示唆してきたPDZK1およびin vitro上皮細胞でタンパク質のsortingに働くとされてきたRab8に着目した。昨年度はPDZK1の薬物動態学的意義の解明として、pdzk1遺伝子欠損(pdzk1^<-/->)マウスを用いた薬物動態試験を行い、PDZK1が相互作用する複数のトランスポーター(PEPT1,OCTN2,OATP1A)の発現制御およびそれら基質の小腸刷子縁膜側からの取り込み制御を行っていることをin vivoで示した。そこで、本年度は新たなトランスポーター制御因子としてRab8に焦点を絞り、rab8遺伝子欠損(rab8^<-/->)マウスを用いたin vivo試験を行った。rab8^<-/->マウスでは小腸刷子縁膜に発現するPEPT1およびSGLT1のsorting異常が起こり、タンパク発現量の顕著な減少が観察された。そこで、それぞれの基質であるcefiximeおよび[^<14>C]α-methyl-d-glycopyranosid([^<14>C]α-MDG)をwildおよびrab8^<-/->マウスに経口投与したところ、両基質の血漿中濃度推移はwildよりもrab8^<-/->マウスで有意に低値を示した。また、単離小腸組織を用いた反転腸管法により小腸管腔側からの取り込み機構をwild、rab8^<-/->マウスで検討したところ、rab8^<-/->マウスにおける両基質の取り込みは細胞間隙マーカーであるmannitolと同程度まで低下しており、経口投与後の血漿中濃度推移の低下は小腸管腔側からの取り込み低下に起因すると考えられた。以上、消化管吸収に関わる薬物輸送担体と機能・発現(局在)調節因子の解明を中心として、本研究は順調に進行している。