Defective eNOS signaling is mediated by Rho-kinase activation in rats with secondary biliary cirrhosis

继发性胆汁性肝硬化大鼠中 Rho 激酶激活介导缺陷性 eNOS 信号传导

• 批准号: 19390352
• 负责人: MAEHARA Yoshihiko
• 金额: $ 12.15万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19390352/
• 关键词: 肝硬; NO; eNOS; Rho-kinase VEGF; 脾門脈外科学; 類洞内皮細胞; 肝星細胞; Rho Kinase; AKT; nitric oxide; 門脈圧亢進症; 肝硬変症; Rho kinase; Akt

(1)硬変肝のeNOSシグナル改善による肝内微小循環障害の改善肝硬変症においては、ETやAT-IIの発現が亢進し、さらに類洞内皮細胞からのNO分泌が低下しているため、肝星細胞の収縮が強まり、類洞血管抵抗が増大し、肝内微小循環が障害され、門脈圧亢進症をきたしている。肝硬変症における類洞内皮細胞のNO分泌障害は、AktによるeNOSのリン酸化障害であることがわかっているが、その機序は不明であった。そこで、類洞内皮細胞におけるAkt-eNOSリン酸化の障害にRho kinaseが関与しているのではないかと仮説をたて、検討した。肝硬変ラットにRho kinase阻害剤であるfasdil (1 or 2 mg/dl)を点滴静注すると門脈圧が約20%、肝内血管抵抗が約30%低下することがわかった。また、Rho kinase阻害剤を用いることで、肝内eNOSリン酸化およびeNOSとAktの結合が増加することも判明し、さらにRho kinaeとAktが直接結合することにより、Rho kinaseがAktとeNOSの結合を阻害し、eNOS酵素活性を傷害していることを証明した。(2)肝再生におけるNitric oxideおよびVEGFの役割肝再生に関して肝細胞再生および血管新生が重要である事が報告されている。そこで、肝再生時における血管新生因子VEGF および類洞血流維持に関与するNO を検討した。 (1)SDラット70%肝切モデルを使用。肝切後(POD1,3,7)に、肝組織血流・肝重量増加率・類洞面積割合・肝組織中VEGF,NOx について検討。(2)L-NAME(NO 合成阻害剤)を腹腔内投与、肝再生について同様な検討を行った。(1)70%肝切後、肝組織血流は一過性上昇後減少するがPOD3 に再度増加、肝重量増加率は経時的に増加。肝組織中VEGF・NOx はPOD3 でピークを示した。(2)L-NAME 投与群で肝重量増加率が非投与群に比しPOD3,7 で有意に低く、肝組織中NOx は抑制されており、肝組織血流は有意に減少、さらに、類洞面積の縮小も認められた。また、肝組織中VEGF も有意に低下していた。肝再生において、NO はVEGF のinductionを介して類洞血管新生ならびに血流維持に働くと考えられる。

(1) hard - liver の eNOS シ グ ナ ル improve に よ る tiny circulating handicap of intrahepatic の improve liver disease of hard - に お い て は, ET や AT - II の 発 now が hyperthyroidism し, さ ら に class hole endothelial cells か ら の low NO secretion が し て い る た め, liver astrocyte の 収 shrinkage が strong ま り vascular resistance, class hole が raised し, tiny circulation が handicap of intrahepatic さ れ, portal Hyperactivity を を た て て る る. Liver disease of hard - に お け る の NO class hole endothelial cells secrete handicap は, Akt に よ る eNOS の リ ン acidification handicap of で あ る こ と が わ か っ て い る が, そ の machine sequence は unknown で あ っ た. そ こ で endothelial cells, class hole に お け る Akt - eNOS リ ン acidification の handicap of に Rho kinase が masato and し て い る の で は な い か と 仮 said を た て, beg し 検 た. Cirrhosis - ラ ッ ト に Rho kinase resistance against tonic で あ る fasdil (1 or 2 mg/dl) を drip static note す る と portal 圧 が about 20%, intrahepatic vascular resistance が about 30% low す る こ と が わ か っ た. ま た, Rho kinase inhibitor against tonic を い る こ と で, intrahepatic eNOS リ ン acidification お よ び eNOS と Akt の combining が raised plus す る こ と も.at し, さ ら に Rho kinae と Akt が directly combined す る こ と に よ り, Rho kinaseがAktとeNOS <s:1> combined with を hindrance <s:1>, eNOS enzyme activity を harm <s:1> て る る る とを proves that た. (2) liver regeneration に お け る Nitric oxide お よ び VEGF の service cut liver regeneration に masato し て liver cell regeneration お よ び angiogenesis が important で あ る matter が report さ れ て い る. Youdaoplaceholder0 で で, における angiogenesis factor VEGF および hole blood flow maintenance に during liver regeneration and するNO を検 discuss た. (1)SDラット70% liver resection モデ を for use. After liver resection (POD1,3,7)に, liver tissue blood flow · liver weight increase rate · cave area resection · VEGF,NOx in liver tissue に て検 て検 discussion. (2)L-NAME(NO synthetic inhibitor)を intraperitoneal administration is the same as liver regeneration に て て な検 treatment を line った. (1) After 70% liver resection, the blood flow in liver tissue briefly increased and then decreased, するがPOD3 に increased again, and the rate of increase in liver weight に increased over time. VEGF · NOx でピ POD3 でピ でピ を を を in liver tissue indicated た. (2) L - NAME cast and group of で liver weight raised rates than し が cast and group of に POD3, 7 で intentionally に く, low NOx in liver tissue は inhibit さ れ て お り, hepatic tissue blood flow は intentionally に reduction, さ ら に, classes, narrow hole area is の も recognize め ら れ た. Youdaoplaceholder0, VEGF に in liver tissue is intentionally に low, <s:1> て た た た. Liver regeneration に お い て, NO は VEGF の induction を interface し て class hole angiogenesis な ら び に maintain blood flow に 働 く と exam え ら れ る.

项目成果

Significance of ERK nitration in portal hypertensive gastropathy and its therapeutic implications

• DOI: 10.1152/ajpgi.90329.2008
• 发表时间: 2008-11-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-GASTROINTESTINAL AND LIVER PHYSIOLOGY
• 影响因子: 4.5
• 作者: Kinjo, Nao;Kawanaka, Hirofumi;Maehara, Yoshihiko
• 通讯作者: Maehara, Yoshihiko

Splenic hemodynamics and decreased endothelial nitric oxide synthase in the spleen of rats with liver cirrhosis.

• DOI: 10.1016/j.lfs.2007.03.009
• 发表时间: 2007-05
• 期刊: Life sciences
• 影响因子: 6.1
• 作者: S. Yamaguchi;H. Kawanaka;D. Yoshida;Y. Maehara;M. Hashizume

Digestive Disease Week in Washington D.C.

华盛顿特区消化疾病周

(一般演題ポスター)

（一般展示海报）

• 作者: 津福 達二、藤田 博正、田中 寿明;他;第106回日本外科学会
• 通讯作者: 第106回日本外科学会