Strukturelle, funktionelle und biochemische Vorgänge an der porcinen Zona pellucida bei Reifung und Befruchtung mit unterschiedlich aufbereiteten Spermien

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Eine zentrale Rolle bei der Befruchtung nimmt die Zona pellucida der Oozyte ein. Matrixoberfläche und dreidimensionale Architektur der Zona pellucida unterliegen dabei Reifungs- und Transformationsprozessen. Für die Interaktion mit der Zona pellucida und eine monosperme Befruchtung ist außerdem der Kapazitationszustand der Spermien, der durch Vorbehandlung, z.B. durch flowzytometrische Trennung der Ejakulate beeinflußt wird, entscheidend. Ziel der Untersuchungen ist es, an in vivo und in vitro gereiften Schweineoozyten sowie während der Befruchtung mit unterschiedlich kapazitierten Spermien (Lectinbindungstest, Tyrosonphosphorylierung und Calcium-Imaging) die strukturellen (Morphometrie, Raster-, Transmissions- und Immunoelektronenmikroskopie, konfokale Darstellung von Disulfidbrücken, Ultrastruktur der Glykosylierung), funktionellen (In vitro-Befruchtung und frühe Embryonalentwicklung) und biochemischen (Glykosilierungsmuster, Glycanmusternachweis, Protein Proecessing) Veränderungen der Zona pellucida zu analysieren. Es wird erwartet, daß die Transformationsvorgänge an der Zona pellucida verständlicher werden und der Grad der monospermen Befruchtungen in vitro verbessert wird.