バクテリオファージを用いた畜産環境中バンコマイシン耐性腸球菌の殺滅

使用噬菌体杀死牲畜环境中的耐万古霉素肠球菌

• 批准号: 19880005
• 负责人: 小田和 賢一
• 金额: $ 1.21万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19880005/
• 关键词: バクテリオファージ; バンコマイシン耐性腸球菌

バンコマイシン耐性腸球菌(VRE)は、ヒトに敗血症などを引き起こす薬剤耐性菌として、世界的に注目される。VREが出現した原因として、畜産環境における抗生物質の多用が指摘されており、畜産環境からの検出報告も実際にある。本研究では、バクテリオファージを用いて、畜産環境中のVREを防除することを目的として、本年度はバクテリオファージの単離と溶菌能力の評価を行った。まず、臨床由来株Enterococcus faeciumを東北大学大学院医学研究科より入手した。各耐性遺伝子特異的プライマー(vanA, vanB, vanC)を用いてコロニーPCRを行った結果、同株がvanA保有型のバンコマイシン耐性腸球菌であることを確認した。東北大学大学院農学研究科附属フィールド教育研究センター内から環境試料として、牛ふん101試料、牛ふん堆積場の液汁2試料、堆積コンポスト1試料、側溝の水1試料、ラグーン水1試料を採取し、これをバクテリオファージ分離源としてプラークアッセイを行い、同分離株を溶菌できるバクテリオファージの単離を探索した。これにより、プラーク形状が異なる2種類のバクテリオファージ(A、B株)を単離した。透過電子顕微鏡による観察により、A、B株の形状は類似しており、頭部は多面体様の構造を持ち、その直径は150nm前後、尾部の長さは50nm前後であった。尾部繊維は両者とも認められなかった。600nmの波長の吸光度測定により、A、B株のVRE株の増殖阻害を評価した結果、両株とも10^5個の添加で、VREの増殖は抑えられた。さらに、10^8個のファージを添加することにより、10^3〜10^4 cells/ml程度のVREを3時間以内にほぼ溶菌した。したがって、本研究で単離したVRE溶菌性バクテリオファージがVRE殺滅に有効であることが示された。

The world's attention has been drawn to resistant enterococci (VRE). The reasons for the occurrence of VRE, the multiple use of antibiotics in livestock environment, and the reporting of VRE in livestock environment This study aims to evaluate the efficacy of VRE in animal husbandry environment. Enterococcus faecium, a clinical origin strain, was developed at the Graduate School of Medicine, Tohoku University. The results of PCR were confirmed for each resistant strain, vanA, vanB, vanC. Environmental samples, sample No. 101, sample No. 2, sample No. 1, sample No. 1, sample No. 2, sample No. 1, sample. 1, sample No. 1, sample No. 1, sample. 1, sample No. 1, sample. 1, sample. There are two types of plants in different shapes (A and B). Through the electron microscope, the shape of A, B plants is similar, the structure of the head is polyhedral, the diameter of the tail is about 150nm, and the length of the tail is about 50nm The tail of the ship is not clear. Absorbance measurements at 600nm for A, B and VRE strains were performed. 10^8 cells/ml and 10^3 ~ 10^4 cells/ml This study was conducted to evaluate the efficacy of VRE.