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gp91phox遺伝子に対するsiRNAを用いた心不全に伴う心室性不整脈の治療

使用针对 gp91phox 基因的 siRNA 治疗与心力衰竭相关的室性心律失常

基本信息

批准号：
19659205
负责人：
中村一文
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

検討1 【目的】心不全患者の心筋において、酸化ズトレス発生が亢進している。中でも過酸化脂質の最終代謝産で、有害アルデヒドである4-Hydroxy-2-nonenal(HNE)が拡張型心筋症患者ならびに拡張相肥大型心筋症患者の不全心筋に蓄積している事を我々は報告してきた(Nakamura K, et al. Circulation2002, J Card Fai1 2005)。今回我々は、HNEが活性酸素発生を介して心筋内カルシウム濃度を増加させると仮定して、実験を行った。【方法】成人ラットの単離心筋においてHNEが活性酸素を発生させるかどうか2',7'-dichlorofluorescin diacetate fluorescence(DCF)を用いて検討した。fura-2を用いて心筋細胞内カルシウム濃度を測定した。【結果】(1)DCF用いて検討したところ、HNE(10 to 100μmol/L)によって、濃度依存性に螢光強度が増強した。すなわち活性酸素が発生した。その発生はNADPH oxidaseの阻害剤(Diphenyleneiodinum : DPIならびにApocynin)によって抑制された。(2)次に、fura-2を用いて心筋細胞内カルシウム濃度を測定した。病的状態に発生しうる高濃度のHNE(400pmol/L)は、心筋において時間依存性に心筋細胞内カルシウム濃度を増加させた。そして最終的に67%の細胞においてhypercontractureをひきおこした。(3)抗酸化酵素であるカタラーゼと、抗酸化作用をもつβ遮断薬であるカルベジロールは心筋細胞内カルシウム濃度増加を有意に減弱させ、hypercontractureの発生を抑制した。抗酸化作用のないβ遮断薬であるプロプラノロールはCa濃度の増加を減弱させなかった。更にL型Ca遮断薬であるverapamilならびにNa/Ca exchanger(NCX)のリバースモードの阻害剤であるKB-R7943も心筋細胞内Ca濃度増加を一部抑制した。【考案】心不全患者の心筋において、酸化ストレス発生が充進しており、その産物であるHNEは、NADPH oxidase由来の活性酸素発生を介して心筋細胞においてCa過負荷を引き起こした。検討2【目的】実際にHNEが心室性不整脈・心室細動(VF)に関与するかどうかBrugada症候群の心筋組織において検討した。【方法】Brugada型心電図の患者の心筋組織におけるHNEeの量とVFの発症について検討する。【結果】SCN5A遺伝子変異を持たない患者においてはVFの有無と心筋HNEの量に関係がなかったが、SCN5A遺伝子変異を持つ患者においては、VF既往患者の方が既往のない患者にくらべ、HNE量が多かった。【考案】Brugada症候群患者において、VF陽性例の心筋で酸化ストレスが増大していた。酸化ストレスがVF発症に関与する可能性が考えられた。上述の結果は、Cardiovasc Pathol(In press)にて報告した。

検question 1 [Purpose] To treat the heart disease and acidosis of patients with cardiac insufficiency. 4-Hydroxy-2-nonenal (HNE), the final metabolite of overacidified lipids, is a harmful and toxic product A patient with a type of myocardial infarction. A patient with a large type of myocardium. K, et al. Circulation2002, J Card Fai1 2005). This time, I will use the active acid 発生して in the heart muscles and increase the concentration of HNE. [Method] Adult ラットの単centrifugal tendon においてHNE を発生させるかどうか2',7'-dichlorofluorescin diacetate fluorescence (DCF) was used いて検した. Fura-2 was measured by measuring the concentration of fura-2 in myocardial cells. [Results] (1) DCF was prepared using the same method, HNE (10 to 100 μmol/L) was used, and the concentration-dependent fluorescence intensity was increased.すなわちActive acid element が発生した.その発生はNADPH oxidase inhibitor (Diphenyleneiodinum: DPI ならびにApocynin) によって inhibits された. (2) The concentration of カルシウム in myocardial cells was measured using いて and fura-2. The state of the disease is caused by the high concentration of HNE (400pmol/L), the time-dependent nature of the heart muscle, and the increase in the concentration of heart muscle cells in the heart muscle cells.そしてFinalに67%のcellにおいてhypercontractureをひきおこした. (3) Anti-acidification enzyme であるカタラーゼと, anti-acidification enzyme をもつβ-blocking 薬であるカルベジロールは thin heart muscle Increasing the concentration of intracellular fluorescein is intended to weaken the effect and inhibit the development of hypercontracture. The anti-acidification effect of β-blocking enzymes is reduced by increasing the Ca concentration. More L type Ca blocking 薬であるverapamilならびにNa/Ca exchanger (NCX) blocker KB-R7943 partially inhibits the increase in Ca concentration in cardiac muscle cells. 【Examination】Heart-sufficiency patient's heart muscle, Acidified ストレス発生がcharge into しており, そのproduct であるHNEは, NADPH The origin of oxidase is that the active acid element is produced and the heart muscle cells are overloaded and caused by Ca overload.検研究2【Purpose】To examine the relationship between ventricular arrhythmia and ventricular fibrillation (VF) caused by HNE and the myocardial tissue of Brugada syndrome. 【Method】The patient's Brugada type ECG was measured in terms of the amount of HNEe and the amount of heart tissue in patients with Brugada type ECG. [Results] There is a relationship between the presence and absence of VF in patients with SCN5A and the amount of heart muscle HNE in patients with SCN5A. CN5A is a patient with a different disease, a patient with a past history of VF, a patient with a past history of VF, and a patient with a high amount of HNE. [Test case] Brugada syndrome patient's heart muscle acidification and heart muscle acidification of patients with Brugada syndrome and VF positive patient's heart muscle are increased. Acidification of VF syndrome is related to the possibility of acidification. The above results are reported by Cardiovasc Pathol (In press).