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鼻性NK/T細胞リンパ腫におけるケモカインおよびケモカインレセプターの解析

鼻NK/T细胞淋巴瘤趋化因子和趋化因子受体分析

基本信息

批准号：
23791869
负责人：
長門利純
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Asahikawa Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23791869/
关键词：
悪性リンパ腫 NK/T細胞ケモカイン EBウイルス

项目摘要

鼻性NK/T細胞リンパ腫の病態解明、新たな診断および治療開発のために、各種ケモカインとその受容体の発現および機能について、腫瘍細胞株および臨床検体を用いて検討した。鼻性NK/T細胞リンパ腫におけるケモカイン発現を網羅的に調べるために、本リンパ腫細胞株の培養上清を用いてケモカインアレイを施行した。鼻性NK/T細胞リンパ腫細胞株として、EBV陽性かつウイルス蛋白であるLMP-1陽性であるSNK6、SNT8、SNK1を用いた。対照として鼻性NK/T細胞リンパ腫以外のNK細胞株であり、EBV陰性であるKHYG1を用いた。その結果、鼻性NK/T細胞リンパ腫細胞株においてKHYG1より有意に発現が上昇しているケモカインとしてTARC、MDC、IL-8、MCP-1が同定された。TARCは3種類の鼻性NK/T細胞リンパ腫細胞株すべてでKHYG1と比較して発現上昇を認めた。MDCはSNK6とSNK1で、IL-8はSNT8とSNK1で、MCP-1はSNT8で発現上昇を認めた。これらのケモカイン産生はELISAによって確かめられ、鼻性NK/T細胞リンパ腫細胞株ではケモカインアレイの結果に一致して、TARCは3つの細胞株すべてにおいて、MDCはSNK6とSNK1で、IL-8はSNT8とSNK1で、MCP-1はSNT8でそれぞれ十分量の産生を認め、時間の経過と共にその産生量は増加した。その他のNK細胞株やNK細胞様T細胞株、T細胞株では、4種類のケモカインはほとんど産生を認めなかった。TARCとMDCの受容体であるCCR4、IL-8の受容体であるCXCR1とCXCR2、MCP-1の受容体であるCCR2の鼻性NK/T細胞リンパ腫細胞株における発現を調べるために、フローサイトメトリーを施行した。CCR4は3つの鼻性NK/T細胞リンパ腫細胞株すべてで発現を認めたが、CXCR1、CXCR2、CCR2は発現を認めなかった。患者血清中のケモカインの発現をELISAにて検討した。当科にて鼻性NK/T細胞リンパ腫と診断された14名の治療前血清を用い、比較対照として10名の健常人血清を用いた。その結果、患者血清において健常人血清と比較しTARC、MDC、IL-8、MCP-1の有意な発現上昇を認めた。クモカインアレイとELISA結果より、鼻性NK/T細胞リンパ腫細胞株では、TARC、MDC、IL-8、MCP-1が他のNK細胞株、NK細胞様T細胞株、T細胞株と比較して特異的に発現していることが示された。また、今回使用した細胞株で4種類のケモカインを産生している細胞株はEBV陽性LMP-1陽性細胞株であった。TARCとMDCはEBウイルス感染B細胞でLMP-1によって発現が誘導されるとの報告がある。IL-8は上咽頭癌でLMP-1によって発現が誘導され、血管新生に関与するとの報告がある。また、MCP-1も上皮細胞株でLMP-1によって発現が誘導されるとの報告がある。以上より、鼻性NK/T細胞リンパ腫細胞株における4種類のケモカイン産生にもEBウイルス感染が関連している可能性が考えられた。鼻性NK/T細胞リンパ腫患者血清おいて、健常人血清と比較し、TARC、MDC、IL-8、MCP-1の有意な発現上昇を認め、患者検体においても4種類のケモカインの存在が確認された。また、鼻性NK/T細胞リンパ腫細胞株において、TARCとMDCの受容体であるCCR4の発現も認められたことから、TARCとMDCに関しては今後オートクラインによる遊走能や浸潤能亢進などについて検討する必要があると考えられた。

Pathological interpretation of nasal NK/T cell proliferation, development of new diagnostics and therapies, development and function of various receptors, and application of tumor cell lines and clinical models The expression of NK/T cells in culture supernatant was studied. Nasal NK/T cell lines, EBV positive, SNK6, SNK8, SNK1 positive NK cell lines other than NK/T cell lines are used in contrast to EBV negative NK/T cells. As a result, nasal NK/T cell proliferation in tumor cell lines increased intentionally with TARC, MDC, IL-8 and MCP-1. TARC has three types of nasal NK/T cells. The expression of KHYG1 is higher than that of KHYG1. MDC SNK 6 SNK1, IL-8 SNT 8 SNK1, MCP-1 SNT8 rise The results of ELISA were consistent with those of nasal NK/T cell lines, TARC 3 was consistent with those of cell lines, MDC SNK6 SNK1 IL-8 SNK1 MCP-1 SNT8 was consistent with those of nasal NK/T cell lines, and increased with time. Other NK cell lines, NK cell lines, T cell lines, and 4 types of NK cell lines are produced. The receptor of TARC and MDC is CCR4, IL-8 and CCR1, CXCR2 and MCP-1. The receptor of CCR2 is a nasal NK/T cell line. CCR4, CCR1, CCR2, CCR3 and CCR4 were identified in the presence of NK/T cells. ELISA was used to detect the development of serum protein in patients. In the present study, 14 pre-treatment serum samples were used for diagnosis of nasal NK/T cell proliferation, and 10 normal serum samples were used for comparison. The results showed that there was an intentional increase in TARC, MDC, IL-8 and MCP-1 in patients 'serum compared with healthy individuals. ELISA results showed that nasal NK/T cell lines, TARC, MDC, IL-8, MCP-1 and other NK cell lines, NK cell lines, T cell lines, and T cell lines were relatively specific. Four cell lines were used to produce EBV positive LMP-1 positive cells. There have been reports of the induction of TARC and MDC by EB irus infection of B cells with LMP-1. IL-8 has been reported to be involved in the induction of LMP-1 in upper pharyngeal carcinoma. The expression of LMP-1 in epithelial cell lines was induced by LPS and MCP-1. The possibility of the above four types of NK/T cell infection is examined. The serum levels of NK/T cells in patients with nasal NK/T cell leukemia were compared with those in healthy subjects. The intentional increase of TARC, MDC, IL-8 and MCP-1 was identified. The presence of four types of NK/T cells in patients was confirmed. The expression of CCR4 in TARC and MDC receptor cell lines was detected in the presence of TARC and MDC receptor cells, and the expression of TARC and MDC receptor cells was detected in the presence of TARC and MDC receptor cells.