ＴｒａＳＨ法による歯周病原細菌の宿主細胞内防御系からの回避機構の解明

使用TraSH方法阐明牙周病原菌逃离宿主细胞防御系统的机制

• 批准号: 24592765
• 负责人: 井上 哲圭
• 金额: $ 3.41万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24592765/
• 关键词: Porphyromonas gingivalis; 歯周病細菌; ジンジパイン; プロテアーゼ; 分泌; Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ; 細胞感染; 細胞内侵入; 細胞内生存; 薬剤排出ポンプ; 薬剤感受性; マイクロアレイ; トランスポゾン

Porphyromonas gingivais (Pg) ATCC 33277株のトランスポゾン変異株ライブラリーのスクリーニングによって新たに見出された本菌の宿主細胞内感染に関わるx遺伝子に関して、本年度の研究により、x遺伝子は本菌の主たる病原因子であるプロテアーゼ（ジンジパイン）の分泌に関わることが明らかとなった。すなわち、新規にx遺伝子の遺伝子欠損株を作製し、血液寒天培地上で培養すると、親株では菌体外に分泌されたジンジパインの作用により黒色集落が形成されるのに対し、x遺伝子欠損株では菌体外ジンジパイン欠損株の特徴である白色集落が形成された。そこで、親株、x遺伝子欠損株およびそのx遺伝子相補株の菌体外ジンジパイン活性の測定を行った。本菌は2種のArg-ジンジパインと1種のLys-ジンジパインを産生する。上記3株の全菌体および培養上清を調製し、各々のジンジパインに特異的な蛍光基質を用いて活性測定を行った。その結果、x遺伝子産物は、3種のジンジパインのいずれの分泌にも関与していることが判明した（第56回歯科基礎医学会にて発表）。さらに、ATCC 33277株のゲノム上にはx遺伝子のorthologが2個存在することもわかった（x2, x3遺伝子）。これらの遺伝子はPgの他の菌株はもとより、近縁のBacteroides属菌種を含む様々な菌種、さらに腸内細菌においてもhomologが広く存在することがわかってきた。このことは、細菌細胞におけるこのx遺伝子の普遍的な機能を示唆しているとも考えられるが、例えば大腸菌においては、菌体外物質の分泌とは異なる機能を有することが報告されており、Pgにおけるx遺伝子産物の役割はマルチファンクショナルなものである可能性も考えられた。今後、Pgにおけるx遺伝子の病原性における役割を検討し、本菌の病原メカニズムの全貌の解明に貢献していく。

Porphyromonas gingivais (Pg) ATCC 33277 strains の ト ラ ン ス ポ ゾ ン - different strains ラ イ ブ ラ リ ー の ス ク リ ー ニ ン グ に よ っ て new た に shows さ れ た の host cells infected with the bacteria に masato わ る x heritage 伝 son に masato し て, this year's の に よ り, x but 伝 は this bacterium の main た る pathogenic factor で あ る プ ロ テ ア ー ゼ (ジ ン ジ パ イ ン) secretion の に masato わ る こ と が ら Youdaoplaceholder0 となった. す な わ ち, new rules に x posthumous son 伝 の heritage 伝 son owe damage strain を for し, blood sees the ground で culture cultivation す る と, parent strain で は secretion of bacteria in vitro に さ れ た ジ ン ジ パ イ ン の role に よ り black color colony が form さ れ る の に し seaborne, x heritage 伝 son owe damage strain で は bacteria in vitro ジ ン ジ パ イ ン owe damage strain の, 徴 で あ る white colony が form さ れ た. そ こ で, parent strain, x heritage 伝 son owe damage strain お よ び そ の x heritage 伝 fill sub facies の bacteria strains in vitro ジ ン ジ パ イ ン determination of active の を line っ た. This bacterium ジ two species of <s:1> Arg-ジ ジパ ジパ <s:1> と と と と and one species of <s:1> Lys-ジ ジパ ジパ を を を を produce する. Three の all bacteria strains were written お よ び culture supernatant を し modulation, the 々 の ジ ン ジ パ イ ン に specific な 蛍 light matrix を with い measurement line を っ て activity た. そ の results, x heritage 伝 zi chan は, three の ジ ン ジ パ イ ン の い ず れ の secretion に も masato and し て い る こ と が.at し た based medical association (56 back 歯 に て 発 table). さ ら に, ATCC 33277 strains の ゲ ノ ム on に は x heritage 伝 son の ortholog が exist two す る こ と も わ か っ た (x2, x3 伝). こ れ ら の heritage 伝 は Pg の him の strains は も と よ り, nearly try の Bacteroides genus species contains を む others 々 な strains, さ ら に intestinal bacteria に お い て も homolog が hiroo く exist す る こ と が わ か っ て き た. こ の こ と は, bacterial cells に お け る こ の x posthumous son 伝 の function of common な を in stopping し て い る と も exam え ら れ る が, example え ば coliform に お い て は, secretion of bacteria in vitro material の と は different な る function を have す る こ と が report さ れ て お り, Pg に お け る x heritage 伝 zi chan material の "cut は マ ル チ フ ァ ン ク シ ョ ナ ル な も の で あ る possible Sexual proficiency test えられた. In the future, Pg に お け る x heritage 伝 son の pathogenicity に お け る service cut を 検 beg し, the bacteria の pathogenic メ カ ニ ズ ム の whole の interpret に contribution し て い く.

项目成果

Porphyromonas gingivalisにおける電気穿孔法に適した新規プラスミドベクターの構築

适合牙龈卟啉单胞菌电穿孔的新型质粒载体的构建

• 发表时间: 2014
• 作者: 田川淳平;井上哲圭;佐藤啓子;内藤真理子;中山真彰;中山浩次;桑原知己;大原直也
• 通讯作者: 大原直也

Porphyromonas gingivalisのPGN_1202（rpoN ）は必須遺伝子である

PGN_1202 (rpoN) 是牙龈卟啉单胞菌的必需基因

• 发表时间: 2013
• 作者: 加野小奈美;井上哲圭;田口裕子;田川淳平;中山真彰;山城隆;大原直也
• 通讯作者: 大原直也

Porphyromonas gingivalisの薬剤排出ポンプ欠損株の薬剤感受性と細胞内侵入性

药物外排泵缺陷型牙龈卟啉单胞菌菌株的药物敏感性和细胞侵袭性

• 发表时间: 2014
• 作者: 井上哲圭;中山真彰;加野小奈美;田口裕子;黒田照夫;大原直也
• 通讯作者: 大原直也

P. gingivalisジンジパインによるPI3K/Akt経路の抑制機序

牙龈卟啉单胞菌对 PI3K/Akt 通路的抑制机制

• 发表时间: 2013
• 作者: 中山真彰;井上哲圭;内藤真理子;中山浩次;大原直也
• 通讯作者: 大原直也

Porphyromonas gingivalisにおいて電気穿孔法で導入可能なプラスミドベクターの構築

可通过电穿孔导入牙龈卟啉单胞菌的质粒载体的构建

• 发表时间: 2013
• 作者: 田川淳平;井上哲圭;佐藤啓子;内藤真理子;中山真彰;中山浩次;山城隆;大原直也
• 通讯作者: 大原直也